哺乳动物的乳汁不仅富含丰富的营养物质,而且对后代自身的免疫应答反应体系的建立也起着重要的作用。广泛存在于各种体液中的exosomes是多核细胞通过内吞作用形成30-100nm小囊泡,其介导包括免疫应答在内的多种生物学过程。MicroRNAs(miRNAs)是一类在真核生物中广泛存在的约19～24nt的内源非编码小RNA。在哺乳动物中,miRNAs通过和蛋白质编码基因的3非编码区不完全互补配对,抑制靶基因mRNAs的翻译过程,从而达到转录后调控的作用。研究表明miRNAs在血清、血浆、唾液、尿液和羊水等体液以及细胞培养的上清液中广泛存在。哺乳动物乳汁中的miRNAs主要存在于exosomes中。因此我们希望通过利用高通量测序的方法测出人乳exosomes中所含有的miRNAs。　　 本研究采用高通量测序技术对人乳汁中exosomes所包被的miRNA转录组进行鉴定,结果表明:　　 (1)在4份人乳样品中一共检测到exosomes包被的miRNAs639条,来自492条pre-miRNAs,其中有59条pre-miRNAs和免疫相关。　　 (2)表达量最高的10个miRNAs的拷贝数占到总拷贝数的62.3％。其中,miR-148a-3p,miR-30b-5p,miR-182-5和miR-200a-3p都与已知的免疫学相关通路密切相关。其中miR-148a-3p占到总拷贝数的34.45％,已被证明与牛乳制品的质量密切相关。　　 (3)乳汁中exosomes包被的59条与免疫极显著相关的pre-miRNAs一共产生98条成熟的miRNAs,miR-17-92及其旁系同源的15条pre-miRNAs一共产生了21条成熟的miRNAs。卡方检验结果表明,人乳exosomes中富集着免疫相关的miRNAs(P＜10-16)。　　 (4)qRT-PCR结果显示,较外源性的miRNAs,内源性的miRNA在不同环境刺激的处理中(室温放置、反复冻融、Rnase孵育、煮沸),具有更强的稳定性。　　 以上结果为深入探讨哺乳动物乳汁中Exosome包被miRNA的生物学功能研究提供了基础数据。