NLRP3炎症复合体在高糖培养的肾小管上皮细胞中的表达及其与细胞凋亡的关系

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:tianwang782
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目的首先探讨NLRP3炎症复合体在高糖环境下培养的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)中的表达情况,并通过转染针对NLRP3的特异性真核表达质粒,进一步研究NLRP3炎症复合体与细胞凋亡之间的关系。方法将体外环境培养的NRK-52E细胞分为5组:(1)正常对照组:培养基含5.6mmol/L D-葡萄糖;(2)等高对照组:培养基含5.6mmol/L D-葡萄糖,24.4mmol/L甘露醇;(3)高糖组:培养基含30mmol/L D-葡萄糖;(4)高糖+阴性对照组:细胞在转染含无关序列的重组质粒后培养于高糖培养基中;(5)高糖+干扰组:细胞转染针对NLRP3的SiRNA表达质粒后培养于高糖培养基中。各组分别培养48h后应用Western blotting检测NLRP3、ASC及Caspase-1和Caspase-3蛋白质的表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果高糖刺激可上调NRK-52E细胞NLRP3炎症复合体的表达(P<0.05)及Caspase-3蛋白质的表达(P<0.05),细胞凋亡率上升(P<0.05);而通过特异性的SiRNA抑制NLRP3蛋白质的表达后,细胞NLRP3炎症复合体表达减少(P<0.05),Caspase-3蛋白质表达减少(P<0.05),细胞凋亡率也明显下降(P<0.05)。结论高糖促进NRK-52E细胞NLRP3炎症复合体的表达,针对NLRP3的SiRNA通过减少NLRP3炎症复合体的表达从而抑制高糖诱导的细胞凋亡。
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