赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白在植物根生长、茎延伸,果实成熟等生长发育过程中发挥重要作用。虽然目前关于该类蛋白的二、三级结构未见报道,但是通过氨基酸序列比对发现,该家族蛋白的C-末端含有12个保守的半胱氨酸残基,分布情况是CX3CX3CX8CX3CX2CCX2CXCX11CPCX12C,其中CXXC结构域通常具有氧化还原活性。因此,本研究旨在利用原核表达系统获取一种新型藏药材手掌参中赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白的野生型(GcGASA)和突变体,并研究其在体内、体外抗氧化活性和抗真菌活性。方法：采用pET-28a(+)作为原核表达载体,构建重组质粒,并以此为模板通过PCR定点突变获得突变体SS-GcGASA,经IPTG诱导表达,及包涵体的变性复性获得可溶性目标蛋白,并分别通过凝胶过滤和SDS-PAGE对融合蛋白进行纯化和鉴定;采用检测蛋白体外清除DPPH自由基和过氧化氢的方法来研究蛋白体外抗氧化活性,并通过检测宿主菌抗过氧化氢损伤的方法来检测蛋白体内抗氧化活性。此外,采用琼脂糖扩散分析法检测融合蛋白及其突变体抗禾谷镰刀菌的活性。结果：测序结果表明：目标基因gcgasa成功插入表达载体pET-28a(+),并引入两个Ser突变位点；SDS-PAGE显示IPTG诱导后的融合蛋白多以包涵体形式存在,通过对包涵体变性复性和凝胶过滤纯化的方法获得较高纯度浓度的野生型和突变型目标蛋白；融合蛋白的体外抗氧化活性实验结果显示野生型蛋白在0.3mg/mL浓度时具有较强的清除DPPH自由基的能力,在有DTT还原剂存在的情况下,野生型蛋白在0.3mg/mL的浓度时具有明显清除过氧化氢的活性,且其活性与浓度正相关,但在此浓度下突变型蛋白却没有抗氧化活性：野生型蛋白的体内抗氧化活性的实验结果显示,与pET28a空载相比,过氧化氢对表达表达目标蛋白的宿主菌的损伤程度明显要弱,尤其是加入高浓度的过氧化氢后,这种现象更明显；融合蛋白的体外抗真菌活性检测结果显示,目标蛋白和突变体浓度为0.3mg/mL时,对禾谷镰刀菌有明显的抑菌活性,而且突变体的抑菌活性比野生型强。