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本文将酶法与化学法有机地结合起来,通过对制备条件的优化,开发出一种兼具两方面优点的多肽合成新方法。首先利用基因工程技术构建毕赤酵母工程菌,发酵得到重组羧肽酶Y。再利用液相酶法合成二肽前体的反应,摸索酶催化最佳反应条件,建立相应的动力学模型。最后,创新性地采用固相酶法合成模型二肽,并利用液相色谱、质谱等多种手段进行表征,扩大了酶在肽合成领域的应用范围。主要结论如下:(1)米曲霉羧肽酶Y在毕赤酵母中的表达:利用分子生物学技术,将米曲霉RIB40的羧肽酶Y基因转化入毕赤酵母GS115菌株中并进行诱导表达,