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脑血管疾病具有发病率高、致残率高、死亡率高和复发率高等特点,是威胁人类健康的最大杀手之一。据流行病学调查得知,全世界范围内脑血管疾病的发病率为140-200/ 10万人口,其平均死亡率为100/10万人口。随着人口老龄化的加剧,脑血管病,尤其是缺血性脑血管病越来越成为威胁人类健康的主要疾病之一,它不仅严重损害了患者的健康和生活质量,也给社会和家庭带来了沉重的负担,引起了世界各国的普遍关注。在我国脑血管病的死亡率已跃居各种疾病之首。而在脑血管疾病中缺血性脑血管病又占多数（约占其总数的55-80%）,脑缺血的病理生理机制复杂,研究认为其与缺血再灌注后能量代谢障碍、兴奋性氨基酸毒性、自由基大量产生、细胞内钙超载、血小板激活、炎症损伤等诸多因素相关。因此,明确脑缺血损伤的病理生理机制,研制和开发出新型、有效、副作用小的防治脑缺血的药物是目前亟待解决的问题。 银杏又称白果,一贯有“植物元老”及“自然界的活化石”之称。银杏叶具有很高的药用价值。世界各地已经将银杏叶提取物广泛用于治疗呼吸系统、心脑血管系统等疾病。体内外实验均证明银杏叶提取物具有明显的神经保护作用,能减轻神经细胞损伤。银杏叶提取物主要成分为黄酮类和萜内酯类,已经证实银杏黄酮有较强的抗氧化作用,银杏内酯具有特异性拮抗血小板活化因子的作用。目前已分离得到银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、银杏内酯M、 银杏内酯J及白果内酯,其中银杏内酯B的抗血小板活化因子的作用最强。 实验用药银杏内酯B（GB）由中国人民解放军总医院301医院开发部提供,该化合物在保持闭环的条件下进行分离提取。本课题根据脑缺血研究概况,从整体、细胞水平利用多种研究方法对银杏内酯B的作用进行了研究。 银杏内酯B化学结构式如下: 分子式C20H24O10 分子量424 1 银杏内酯B 对局限性脑缺血损伤大鼠的保护作用 实验采用三氯化铁贴附大脑中动脉致大鼠血栓模型观察GB的作用。结果表明,GB能减小脑梗塞范围,延缓梗死区神经元树突与神经元胞体的变性坏死,对过渡区神经元2 银杏内酯 B 抗脑缺血作用及机制研究胞体和神经元树突有保护作用,加强对照区神经元胞体和树突的适应性变化,对神经元树突的保护作用强于对神经元胞体保护作用。结合组织学病变性质,充分显示GB 防治大鼠MCAT模型脑梗死继发性脑损伤的作用特征:剂量依赖、功能保护大于形态保护、促进非梗死区适应过程大于阻止过渡区继发损伤过程、降低神经元变性（渐变）的类型和范围大于抑制神经元坏死（剧变）的发生。本文对 GB 的作用分别从对过渡区神经元、梗死区神经元及对照区神经元的保护作用作了详细的探讨。实验采用缺血3小时再灌注21小时的造模方法,观察GB对脑缺血再灌注损伤大鼠神经症状、脑梗塞范围的影响。结果表明,大鼠由于大脑经过缺血再灌这一损伤出现肢体偏瘫无力等神经症状;TTC染色结果表明,出现肢体偏瘫无力的大鼠的确出现脑梗塞现象,GB8mg/kg及4mg/kg均能改善大鼠神经症状,减小大鼠脑梗塞范围,抑制率分别为10.48%及11.40%。采用与上述相同造模方法,观察 GB 对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧脑组织匀浆SOD、MDA、GSH、GSH-PX、CAT、NO、ATPase、LDH、LD 的影响。结果表明,缺血再灌注损伤能引起SOD活力的下降,GB能提高大鼠脑组织匀浆SOD活力,GB8mg/kg组,GB 4mg/kg组与模型组比较SOD活力明显升高（P<0.01,P<0.01）;与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑组织匀浆MDA含量明显升高（P<0.01）,GB8mg/kg,4mg/kg,2mg/kg能明显降低 MDA 含量（P<0.01,P<0.01,P<0.05）;模型组大鼠脑组织匀浆 LDH 活力明显高于与假手术组（P<0.01）,GB对缺血再灌注引起的LDH活力升高有明显的降低作用,GB8mg/kg组,GB 4mg/kg组,GB 2mg/kg组的LDH活力明显低于模型组（P<0.01,P<0.01,P<0.01）;与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑组织匀浆 LD 含量明显升高,用药组GB8mg/kg,4mg/kg,2mg/kg 对缺血再灌注引起的LDH 含量升高没有明显作用;缺血再灌注使大鼠脑组织匀浆 NO 含量明显升高,而使 CAT 活力显著降低,GB8mg/kg 组、GB4mg/kg 组和GB 2mg/kg 组均能显著降低缺血脑组织匀浆NO 含量（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;GB 以上各剂量组能显著升高 CAT 的活力（P<0.01,P<0.01,P<0.05）;与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑组织匀浆中GSH含量显著降低（P<0.05） , GB8mg/kg能显著升高缺血侧脑组织匀浆GSH的含量（P<0.01）,GB4mg/kg及2mg/kg对缺血脑组织匀浆 GSH 的含量无明显升高作用;脑组织缺血再灌后,模型组大鼠 GSH-PX 活力与假手术组比较显著降低（P<0.05）, GB8mg/kg 及4mg/kg 能显著升高GSH-PX 活力（P<0.01,P<0.01）,GB2mg/kg 对 GSH-PX 活力的升高无明显影响;模型组大鼠 Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase 活性与假手术组比较均明显降低,GB8mg/kg、4mg/kg 能升高Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase 活性。GB 对大脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤的保护作用,可能与其抗氧化应激、抗自由基损伤、改善能量代谢、抗NO损伤有关。2 银杏内酯B 对谷氨酸致原代培养皮层神经元损伤的保护作用体外培养新生大鼠皮层神经细胞,以谷氨酸作为引起神经细胞损伤的刺激物