论文部分内容阅读
目的:利用活体成像技术观察复方开口箭合剂对小鼠乳腺癌4T1-luc生长凋亡的影响及肿瘤细胞凋亡蛋白Caspase-3、Cle-caspase-3的表达。方法:将荧光素酶标记的小鼠乳腺癌细胞4T1-Luc接种于小鼠乳垫处,建立荧光素酶标记的小鼠乳腺癌细胞模型。将60只BALB/C-nu小鼠随机分为正常对照组(Nomal controls group)、模型组(Model group)、复方开口箭合剂低剂量组(COAM low-dose group)、复方开口箭合剂中剂量组(COAM medium-dose group)、复方开口箭合剂高剂量组(COAM high-dose group)、低分子肝素组(LMWH group),每组10只。除正常对照组未造模外,其余组小鼠全部造模成功后,给予药物干预。复方开口箭合剂(高、中、低剂量)组分别给予6g/ml、3g/ml、1.5g/ml复方开口箭合剂中药灌胃;低分子肝素组给予低分子肝素(1500U/Kg)腹腔注射;模型组及正常对照组给予等剂量蒸馏水灌胃。利用裸鼠活体成像系统分别在接种时、造模成功后、给药后第7天、第14天观察小鼠4T1-luc乳腺癌细胞移植瘤数量及分布。采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡;RT-PCR检测肿瘤细胞Caspase-3 m RNA的表达;Western Blot法检测Caspase-3和Cle-caspase-3蛋白的表达。结果:活体成像结果显示各治疗组总光子数明显降低,光子数复方开口箭合剂低剂量组>中剂量组>高剂量组。通过TUNEL检测到复方开口箭合剂各治疗组随着剂量的增加凋亡指数明显升高,且第14天>第7天。RT-PCR检测到各治疗组Caspase-3 m RNA的表达明显升高,且表达量复方开口箭合剂高剂量组>中剂量组>低剂量组。Western Blot测到复方开口箭合剂高、中、低三个组Caspase-3和Cle-caspase-3蛋白的表达升高,呈现明显的剂量依赖性和时间依赖性。且通过比较还发现给药后第14天复方开口箭合剂高剂量组总光子数低于低分子肝素组,凋亡指数、Caspase-3 m RNA、Caspase-3和Cle-caspase-3蛋白表达均高于低分子肝素组。结论:复方开口箭合剂能抑制小鼠4T1-luc乳腺癌移植瘤的生长,并呈现剂量依耐性和时间依耐性。复方开口箭合剂具有上调Caspase-3蛋白表达,促进乳腺癌肿瘤细胞凋亡的作用。