论文部分内容阅读
肝癌（Liver cancer）在全球恶性肿瘤死亡率排序中位居第三,在我国则位居第二,严重威胁着我国乃至全世界人类的健康。虽然近年来我国在肝癌研究及诊疗方面取得巨大的进展,但肝癌的总体预后并无显著改善,其总体术后5年复发率依然高达61.5%。因此,开发治疗肝癌的新药势在必行。人参皂苷Rk1（G-Rk1）和人参皂苷Rg5（G-Rg5）是稀有人参皂苷,它们是对人参进行加工后制备得到的具有一定的抗癌、抗炎和抗衰老活性的活性成分,然而这两种人参皂苷对肝癌细胞的作用及其诱导肝癌细胞凋亡的机制尚不清楚。MHCC-97H细胞是一类由复旦大学肝癌研究所建立的HBsAg及AFP阳性表达的高转移性人肝癌细胞株,适用于G-Rk1、G-Rg5对肝癌细胞作用的研究。本研究旨在利用MTT比色法、DAPI染色法、流式细胞术、Casapse-3,-8,-9活力测定、线粒体膜电位测定及蛋白质免疫印迹等一系列细胞生物学手段探究G-Rk1、G-Rg5诱导人肝癌MHCC-97H细胞凋亡的作用并阐明其机制。通过研究发现:G-Rk1与G-Rg5均可以抑制人肝癌MHCC-97H细胞增殖,G-Rk1与G-Rg5的半数抑制浓度(IC50值)分别为12.3μg/mL和4.5μg/mL。G-Rk1与G-Rg5这两种人参皂苷作用于人肝癌MHCC-97H细胞后会传递凋亡信号,导致Bak和Bax快速显著易位并促使线粒体外膜（MOM）透化,进而导致Cyto.c由线粒体释放出来激活Caspase-9,从而启动内源型凋亡途径。Caspase-8虽然也被激活但其被激活的程度远低于Caspase-9。以上结果表明:G-Rk1与G-Rg5虽然可以启动外源型凋亡途径,但主要是通过内源型凋亡途径诱导细胞凋亡。另外值得关注的是:G-Rk1与G-Rg5处理后,抗凋亡蛋白质c-IAP2和XIAP的细胞水平表达量显着下调,而Bcl-xL、c-IAP1和Bcl-2的表达水平则保持不变。