鸭乙型肝炎病毒感染模型的建立及应用

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ganjinwei2001
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乙型病毒性肝炎是危害严重的病毒性传染疾病,是我国当前流行最为广泛、危害性最严重的传染病之一。基于世界各国对有效预防及治疗乙型肝炎的迫切需求,抗乙型肝炎的研究力度不断加大,研究活动趋于深入;但是,经过几十年的研究探索之后,人们依然没有找到有效治疗乙型肝炎的方法。虽然通过注射乙型肝炎的疫苗可以起到很好的预防作用,但对于已经感染乙型肝炎病毒的个体并没有切实有效的治疗手段。  缺少理想的动物模型是乙型肝炎治疗药物研究进展缓慢的原因之一。目前针对乙型肝炎的药物临床前研究手段主要是基于细胞水平的研究,由于乙型肝炎病毒对于宿主具有较高的选择性,很难建立可以感染人乙型肝炎病毒的动物模型。黑猩猩与人类具有极高的基因序列同源性,一段时间内人们曾用黑猩猩作为宿主感染人乙型肝炎病毒进行相关研究,但这种以灵长类动物为模型的实验不仅难以普及,饲养成本昂贵,并且已被禁止使用,因此寻找一个可替代的动物模型迫在眉睫。鸭乙型肝炎病毒与HBV同为嗜肝DNA病毒科,在病毒感染的发生发展环节与HBV较为相似,是目前常用的HBV研究模型。  本课题的目的是建立一个动物水平的乙型肝炎病毒研究模型,从而可以对已有细胞水平的实验结果进行进一步的验证,使更加深入的研究成为可能。本课题首先对造模的病毒注射方式进行摸索,分别用腹腔注射及腿静脉注射两种方式向雏鸭体内注射鸭乙型肝炎病毒,利用QPCR对造模后鸭血清中DHBV-DNA拷贝量进行检测,进而确定适宜的造模方式为腿静脉注射。之后进一步检验季节对造模的鸭肝炎病毒扩增的影响,分别对比春季和夏季的造模试验结果,确定适宜的造模季节为夏季。我们运用HBV治疗的常用药物拉米夫定验证DHBV模型可用于抗病毒活性化合物的评价。最后我们利用建立的DHBV模型对抗HBV候选新药NZ系列化合物抗病毒活性进行了验证,为进一步抗病毒作用机理的研究提供了研究方法。
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