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目的:研究环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)对骨形态发生蛋白-9(Bone morphogenetic protein-9,BMP9)诱导间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的影响及其影响的可能机制。 方法:本课题采用组织化学染色及化学发光法实验、钙盐沉积实验、Western blot和PCR实验,研究COX-2对BMP9诱导MSCs成骨分化的影响及其影响的可能机制。实验具体步骤如下: 1.通过体外细胞培养实验,检测COX-2选择性抑制剂对BMP9诱导MSCs成骨分化的影响。 2.通过体外细胞培养实验,检测在BMP9和/或BMP9合并外源性过表达或沉默COX-2情况下,对BMP9诱导MSCs成骨分化的影响。 3.通过体内异位成骨实验,检测COX-2不同表达状态对BMP9诱导MSCs异位成骨能力的影响。 4.通过体外细胞培养实验,分析COX-2对BMP9诱导MSCs的BMPs/Smads信号转导的影响。 结果: 1.抑制COX-2的酶活性或沉默表达COX-2,均能明显抑制BMP9诱导MSCs成骨分化。外源性过表达COX-2明显增强BMP9诱导MSCs成骨分化。 2.抑制COX-2的酶活性或沉默表达COX-2,均能明显抑制BMP9诱导重要成骨分化转录调节因子在MSCs中的表达,而外源性过表达COX-2增强BMP9诱导这些成骨分化转录调节因子在MSCs中的表。 3.外源性过表达COX-2增强BMP9诱导MSCs异位成骨能力,而沉默表达COX-2则抑制BMP9诱导MSCs异位成骨能力。 4.COX-2能增强BMP9在MSCs中激活的BMPs/Smads信号转导。 结论:COX-2在BMP9诱导MSCs成骨分化过程中具有重要作用,这种作用可能至少与增强BMPs/Smads信号转导有关。