本研究以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌四种菌为工作菌,用微生物方法检测环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星及其三种药物混合物(简称诺-恩-环混合物)在鸡组织中的残留。首先,通过三种药物在磷酸盐缓冲液、肌肉、肝脏和肾脏中最低检测限的测定,确定该方法所能达到精确度,初步证实该方法的可行性;然后通过标准曲线的绘制,综合三种药物的浓度对数与抑菌圈直径的线性关系,得出各自的线性回归方程与相关系数。通过回收率的测定,验证该研究方法的可行性。最后根据标准曲线,利用抑菌圈直径大小与药物浓度对数成正比的原理,检测出不同时间三种药物及其混合物在鸡组织中的残留。 三种药物最低检测限的测定:实验结果表明:三种药物的最低检测限在相同菌种条件下,在磷酸盐缓冲液和相同组织中有一定的差异;同一种药物的最低检测限在不同菌种条件下,在磷酸盐缓冲液和相同组织中也有一定的差异。在磷酸盐缓冲液中,不同药物对不同菌种的最低检测限分布在 0.025～0.40μg/ml;在肌肉中,最低检测限分布在 0.05～0.60μg/g;而在肝脏和肾脏中,三种药物对四种菌种的最低检测限分布在 0.075～0.90μg/g。对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌四种不同菌,恩诺沙星的最低检测限较低;对于环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星及其三种药物混合物,藤黄微球菌对于三种药物的敏感性最强,检测限也最低,达到 0.025μg/ml。 三种药物标准曲线的绘制:本研究通过实验制备了三种药物对四种菌的标准曲线,其标准曲线范围为各自药物在磷酸盐缓冲液中所测的最低检测限至 5倍最低检测限。结果表明,所求得的回归方程中,相关系数均大于 0.99,符合精密度要求。在所有标准曲线中,以藤黄微球菌对三种药物及其混合物的斜率较高,表明藤黄微球菌对环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星及诺-恩-环混合物敏感性最强,其次是大肠杆菌,枯草芽孢杆菌敏感性最低。 三种药物回收率的测定:通过对环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星及其三种药物混合物的回收率实验和精密度测定,结果表明,回收率均大于 70%,变异系数在 15%以内。符合组织样品处理的真实度和精密度。其中以三种药物及其混合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的回收率大于枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌所测得的回收率;对于不同组织,在肝脏和肾脏中所测得的回收率明显高于在肌肉中的回收率;对于不同药物,三种药物混合物对四种菌所测得的回收率均高于单个药物所测得的回收率,变异系数也较小。 三种药物残留的检测:本研究用微生物方法在不同时间内对肉鸡组织中药