利用多倍体诱导和转基因技术创制芦笋新种质的研究

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jk0803liuyan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
芦笋是世界十大名贵蔬菜之一,含有多种活性药用成分以及其它重要的营养成分,素有“蔬菜之王”的美誉。然而随着芦笋种植面积的不断增加,病害、低产等问题也随之出现,严重制约着芦笋产业的长期稳定发展。因此培育抗病、高产的芦笋新品种成为当务之急。本研究针对芦笋抗病、高产的新品种培育的需要,利用多倍体诱导和转基因技术进行了芦笋新种质的研究。主要研究结果如下:1.芦笋多倍体诱导工作中,以“新王朝”和“达宝利”两个芦笋品种的露白种子作为诱导处理对象,以秋水仙素(添加2%DMS0)处理浓度和处理时间作为诱导因子,设计多个梯度的正交试验,研究其对芦笋四倍体诱导率的影响,结果发现最佳的秋水仙素处理组合为:0.15%的秋水仙素(添加2%DMSO)处理16h,诱导率高达31%。经过流式细胞仪和染色体计数法两种方法对四倍体进行鉴定后,发现二倍体芦笋的染色体数目为20条,而四倍体染色体数目为40条;流式细胞仪鉴定结果中,二倍体植株的DNA荧光强度主吸收峰值为四倍体的二分之一;形态学、细胞学和叶绿素含量水平的对比发现,与二倍体相比,四倍体芦笋植株粗壮、叶片长度和直径增加,气孔细胞密度减少,气孔细胞体积增大,叶绿体数目和叶绿体含量增加。2.以“井岗701”芦笋无菌苗作为研究对象,各种不同浓度的植物激素作为诱导因子,设计了一系列的正交试验,最后通过SPSS19.0软件进行结果方差分析,确定了最佳诱导芦笋愈伤组织、胚状体以及芦笋组培苗的激素浓度组合:最佳的芦笋愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D2mg/L+KTlmg/L+25g/L蔗糖+卡拉胶6.5g/L(pH5.8);最佳的芦笋胚状体诱导培养基为MS+4%蔗糖+800mg/L谷氨酰胺+500mg/L酸水解酪素+0.70mg/L嘧啶醇+0.10mg/L NAA+0.50mg/L kinetin+7.0g/L卡拉胶pH5.8;最佳的芦笋组培苗诱导培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+30g/L蔗糖+卡拉胶6.5g/L(pH5.8)。成苗率达到60%左右。室外移栽成活率高达90%。3.开展了芦笋遗传转化体系建立的研究,成功构建了含有hevein-like基因的pCAMBIA3300植物表达载体,并转入农杆菌EHA105菌株中。并以“井岗701”芦笋胚状体作为侵染对象,研究了最佳的农杆菌转化芦笋胚状体的最佳条件,结果为:预培养2d,菌液浓度OD600=0.6,侵染时间10min,共培养时间4d,AS浓度200μmol/L,对转化芦笋苗进行PCR检测,阳性率为21%。
其他文献
随着第一台电脑的诞生,电脑就以不可逆转之势迅速在各个行业发挥了举足轻重的作用,为人们的学习,工作,生活,娱乐提供了便利,互联网的出现极大的促进了各国之间的沟通,也为国际贸易的
《春江花月夜》是唐代诗人张若虚的作品。《春江花月夜》这首诗共三十六句,每四句一换韵,以富有生活气息的清丽之笔,创造性地再现了江南眷夜的景色。如同月光照耀下的万里长江画
为了保持牛奶新鲜,牛奶收集站须先将牛奶降到4~6℃,再运送或保存。本文提出奶站采用热泵给牛奶降温的同时将水加热以供清洗之用,并从初投资和年运行费用2方面,对这种新的制冷供热
目前,推进企业财务标准化、规范化、精细化管理,是促进企业深化改革的有效途径和重要手段。财务管理是企业管理的直接组成部分,是生产经营、目标任务完成情况的具体体现,是标准化
王阳明是明代的理学大师,《龙场教条示诸生》是其书院教育思想的重要表现。与朱熹《白鹿洞书院揭示》相比较,它展示了阳明教育思想的心学特质,而这与王阳明在贵州的经历有重要关
【目的】对青天葵进行多倍体诱导和鉴别研究,获得多倍体植株。【方法】通过比较自然和组培条件下根状茎和球茎的诱导率、浸泡法和琼脂法,筛选青天葵多倍体诱导材料和诱导方法
今年“巴菲特午餐”拍卖终于落锤,一名匿名买家以345.6789万美元的价格竞得与美国著名投资人、“股神”沃伦·巴菲特共进午餐的机会,这一价格也平了“巴菲特午餐”拍卖以来的最
报纸
余热及废气排放问题是制约生产可持续发展的重要因素,为充分利用轮胎硫化过程中产生的高温蒸汽,需要对轮胎生产车间的制冷采暖系统进行改造。本文针对威海三角轮胎150万套生产
质量作业成本控制应视为一种专题性的定位型战略,是从质量关联作业的层面进一步拓展的集聚战略,这一集聚包含了成本统率战略与标歧立异战略的双重集聚,即质量是作业成本集聚与质