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目的检测肝内胆管癌细胞系(RBE)中NCAM+c-Kit+细胞亚群的肝脏祖细胞特性。方法采用免疫磁珠法筛选高纯度特定免疫表型(NCAM+c-Kit+和NCAM"c-Kit-)的RBE细胞亚群,通过体外培养和体内移植实验检测NCAM+c-Kit+RBE细胞是否具有肝脏祖细胞特性(体外增殖、分化,克隆形成及体内成瘤能力)。结果1.NCAM+c-Kit+RBE细胞在490nm波长处吸光度平均值高于NCAM-c-Kit-RBE细胞,其差异有统计学意义(F亚群=23.56,P<0.01)；2.两亚群细胞无血清培养基培养5天后单细胞成球率分别为39.1%、7.46%,两亚群细胞的成球率差异有统计学意义(x2=18.51,P<0.01)；3.裸鼠移植瘤实验中1×104个NCAM+c-Kit+RBE细胞接种2周即可成瘤(66.7%),相同实验条件下NCAM-c-Kit-RBE细胞需要1×106个接种3周方可成瘤(16.7%),两亚群细胞成瘤率差异有统计学意义(P=0.04)；4.NCAM+c-Kit+RBE细胞球无血清培养15天后其内NCAM+、c-Kit+细胞比率(79.0%、55.3%)较接种前(99.1%、98.5%)明显下降,说明NCAM+c-Kit+RBE细胞不仅具有肝脏干／祖细胞的自我更新能力,还具备体外分化能力。结论1.NCAM+c-Kit+RBE细胞亚群体外增殖能力高于NCAM-c-Kit-细胞亚群；2.NCAM+c-Kit+RBE细胞亚群体外克隆形成能力高于NCAM-c-Kit-细胞亚群；3.NCAM+c-Kit+RBE细胞亚群体内成瘤能力高于NCAM-c-Kit-细胞亚群；4.NCAM+c-Kit+RBE细胞亚群具有体外分化能力；综上,肝内胆管癌细胞系中NCAM+c-Kit+RBE细胞亚群具有肝脏祖细胞特性,NCAM联合c-Kit可作为分离、纯化胆管癌干、祖细胞的标志物。