【摘 要】
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目的:乙型肝炎患者糖尿病发病率显著高于正常人群,但乙型肝炎并发糖尿病的机制仍不明确。本文应用鸭乙型肝炎病毒（DHBV）感染模型研究病毒的肝内和肝外组织感染及其对机体葡萄糖稳态的影响。方法:（1）从97只具有相同遗传背景的麻鸭采集全血并分离血清,提取麻鸭血清DNA,并以此为模板进行PCR检测筛选携带DHBV的麻鸭。荧光定量PCR检测DHBV阳性血清的DHBV DNA含量。（2）分别提取DHBV阳性血
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目的:乙型肝炎患者糖尿病发病率显著高于正常人群,但乙型肝炎并发糖尿病的机制仍不明确。本文应用鸭乙型肝炎病毒（DHBV）感染模型研究病毒的肝内和肝外组织感染及其对机体葡萄糖稳态的影响。方法:（1）从97只具有相同遗传背景的麻鸭采集全血并分离血清,提取麻鸭血清DNA,并以此为模板进行PCR检测筛选携带DHBV的麻鸭。荧光定量PCR检测DHBV阳性血清的DHBV DNA含量。（2）分别提取DHBV阳性血清的肝、胰、肾和骨骼肌组织的DNA,以血清DHBV DNA为阴性,滚环扩增联合跨缺口PCR检测肝内和肝外组织中DHBV ccc DNA。荧光定量PCR检测肝、胰、肾和骨骼肌组织的DHBV DNA含量。（3）通过荧光原位杂交（FISH）实验进一步验证肝、胰、肾和骨骼肌组织的DHBV感染。（4）检测禁食16小时麻鸭的空腹血糖,进行静脉注射葡萄糖耐量试验（GTT）。（5）提取麻鸭葡萄糖耐量试验期间的血浆,检测血浆胰岛素水平。（6）使用SPSS18.0软件进行统计学分析。one-way ANOVA分析DHBV感染和非DHBV感染的麻鸭在GTT期间的血糖水平和血浆胰岛素水平的变化;Spearman相关系数分析检验血糖和胰岛素与组织DHBV DNA水平之间的相关性。结果:（1）对97只麻鸭的血清DNA进行PCR检测筛选,53只麻鸭先天感染DHBV,44只麻鸭未感染DHBV,DHBV的感染率为54.6%。（2）提取DHBV阳性血清的肝、肾、胰和骨骼肌组织DNA,应用滚环扩增联合跨缺口PCR检测组织DNA和血清DHBV DNA,DHBV ccc DNA检出率分别为100%,75.5%,67.9%和47.2%。荧光原位杂交（FISH）的进一步验证该结果。（3）DHBV感染和非DHBV感染的麻鸭之间,基线血糖水平均无差异（P＞0.05）。葡萄糖耐量试验（GTT）期间的15分钟和30分钟可观察到DHBV感染的麻鸭血糖水平明显高于非DHBV感染的麻鸭（P＜0.05）。此外,骨骼肌DHBV ccc DNA检测为阳性的麻鸭其血糖水平异常升高持续2小时（P＜0.01）。肝内外组织的DHBV感染与血糖水平显著升高相关。（4）在GTT期间,DHBV感染与非DHBV感染的胰岛素基线水平（P＞0.05）和注射葡萄糖后的胰岛素水平（P＞0.05）无显着差异。肝内外组织的DHBV感染与血浆胰岛素水平无显著相关性。结论:（1）DHBV可感染肝组织以及肾脏、胰腺和骨骼肌等肝外组织,其中骨骼肌的DHBV感染是首次发现。（2）DHBV感染动物在GTT期间血糖水平显著升高,且异常升高的血糖与肝内外组织的病毒感染相关。
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