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目的:本课题致力于研究一种更为简便的、快速的、不改变生物活性的99mTc标记EGF的方法；探索99mTc标记表皮生长因子（99mTc-EGF）对肿瘤显像诊断作用。方法:首先运用还原剂巯基乙醇使EGF分子的二硫键还原，然后用 Sephadex G50柱去掉多余的还原剂，由MDP药盒提供的Sn2+将高价锝还原使之与还原的EGF的巯基结合，通过内皮细胞的培养鉴定99mTc-EGF的生物活性。体外实验：1）C6细胞放射性摄取实验：24孔板接种C6细胞2×105个，移入细胞培养箱培养，当细胞数量达到50%左右时，4℃分别与不同浓度的99mTc-EGF孵育进行细胞摄取实验,EGF终浓度分别为0.0165nM（0.208KBq）、 0.165nM(2.08KBq)、1.65nM(20.8KBq)、16.5nM(208KBq)、165nM(2080KBq)，同时以胶质细胞作为对照；2）C6细胞放射性滞留实验：24孔板接种C6细胞2×105个，移入细胞培养箱培养，当细胞数量达到50%左右时，与EGF终浓度为165nM的99mTc-EGF(2080KBq)分别孵育不同时间（5min 、10min 、30min 、 1h 、2h 、3h 、6h）进行细胞的放射性滞留实验，同时用神经胶质细胞作为对照。32只体重为100-150克的Wistar大鼠右股内侧皮下接种C6肿瘤细胞数约1.5×106左右建立鼠胶质瘤模型，2周后肿瘤长至0.5-1cm时随机分为四组，每只尾静脉<WP=5>注射3.7MBq的 99mTc-EGF后分别在30分钟、2小时、4小时及6小时眼静脉取血，解剖动物，观察99mTc-EGF 在鼠血液、心、肝、脾、肾、胃、肠、肺和瘤组织放射性分布。每只荷瘤鼠与正常对照鼠尾静脉注射3.7MBq 99mTc-EGF，给药后4小时置Siemens Diacam型SPECT下进行显像。结果：99mTc -EGF标记率为76.29%，99mTc -EGF生物活性与EGF对照组比较无明显变化(P>0.05)。摄取实验中C6细胞摄取99mTc -EGF的cpm值随着99mTc -EGF浓度的升高而升高，在165nM达到最高值，而神经胶质细胞对照组摄取99mTc -EGF的cpm值无明显的变化；滞留实验显示C6细胞随着与99mTc -EGF孵育时间的延长而有增加的趋势。体内放射性分布实验：99mTc -EGF在正常组织中主要分布于肝脾肾等组织，瘤区放射性分布较高，脑组织最低，其他组织均无明显的放射性浓聚。SPECT显像清晰，瘤组织放射性分布明显，肝脾组织放射性分布较高,轮廓完整。结论：本方法标记方法简便，标记率76.29%，具有良好的稳定性，瘤区放射性摄取高，除肝、脾、肾外T/TN比值高，图像清晰。99mTc直接标记EGF有望为临床神经胶质瘤的诊断及其为高表达EGFR的肿瘤提供一种新的、特异性的、分子水平的核医学诊断方法。