杂交石斑鱼(褐点石斑鱼♀×清水石斑鱼♂)生长激素、生长激素受体及雌激素受体的分子识别、生物信息学和表达谱分析

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生长激素可以对脊椎动物产生促进包括身体生长,刺激特定的代谢和精确基因的转录调控在内大量的生物作用。它通过靶组织上的生长激素受体促进这些生物活性。生长激素有反应的靶细胞则含有膜结合的生长激素受体。这与其他细胞因子受体相似;信号转导由一个GH结合两个GHR引发,形成一个受体二聚体。同样,类固醇激素在脊椎动物的生殖生物学中发挥着重要作用。包含雌激素,雄激素和孕激素的类固醇激素的几种目前叙述的活性都是由限制在靶细胞核中的精确受体介导的。在硬骨鱼类和仓鼠配体激活转录因子中,至少存在ERα、ERβ1和ERβ2三种雌激素受体。雌激素不是单一通过雌激素受体发挥作用的的雌性生殖激素,而是在包括鱼类在内的脊椎动物的整个身体中起作用,并参与雄性和雌性所有性别的生理和病理状态。例如,在人类中,雌激素调控下颌骨保护、循环和中枢神经系统以及生殖系统。对杂交脊椎动物尤其是杂交石斑鱼的生长激素、生长激素受体和雌激素受体的了解相对较少。因此,本研究是采用母本褐点石斑鱼与父本清水石斑鱼杂交出来的石斑鱼,作为研究杂交脊椎动物的GH,GHR和ERs的模型。具体目的是研究存在于杂交石斑鱼中的生长激素,生长激素受体(GHR1或GHR2和雌激素受体(ERα,ERβ1和ERβ2),并且对之后它们的表达也进行了研究。将杂交石斑鱼GH、和ERs cDNA从脑垂体、脑、肝和心脏cDNA文库中分离出来。GH序列分析显示:5’非翻译区146bp,开放阅读框588bp,3’非翻译区166bp,全长899bp,编码蛋白156个氨基酸残基。GHR1显示6bp的5’utr,开放阅读框1842bp,328bp的3’utr,总长度2176bp,编码蛋白612个氨基酸残基。建立了由48 bp的5’utr、708 bp的开放式阅读框和1068bp的3’utr组成的GHR2编码蛋白,总长度为1824 bp,氨基酸残基235个。另一方面,ERα显示5’utr为172 bp,开放式阅读框为1866 bp,3’utr为354 bp,总长度为2391 bp,编码蛋白质的氨基酸残基为621个。以53 bp的5’utr、1638 bp的开放式阅读框和457bp的3’utr组成ERβ1,使编码蛋白总长2626 bp,氨基酸残基546个。建立了含1075bp的5’utr、732bp的开放式阅读框和532bp的3’utr的ERβ2,使编码蛋白全长2339bp,氨基酸残基244个。这些结果证实了杂交石斑鱼中GH/GHRs和ERs的特性,并为进一步研究提高杂交石斑鱼生长速度提供了良好的材料。
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