天然、重组水蛭素对大鼠随意皮瓣ET、TXB2的影响

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目的:通过检测大鼠随意皮瓣ET、TXB2的含量,探讨局部应用天然、重组水蛭对随意皮瓣血运的影响。方法:选健康Wistrar大鼠21只,体重在250~300g,随机分为A组、B组、C组三组,每组7只。A组:局部注射天然水蛭素;B组:局部注射重组水蛭素;对照组C组:局部注射生理盐水。在大鼠背部设计建立10CM×3CM(长宽比二3.34:1)、蒂在尾部的超长随意皮瓣淤血模型。掀起皮瓣后直接回植,并于术后及时、术后3天、术后5天各组分别在皮瓣远端局部皮下注射给予等量相应药物。定时观察各组大鼠饮食、精神、活动及皮瓣颜色、水肿程度等状况。于术后及时、术后3天、术后5天和术后7天取皮瓣中心组织块,制成组织匀浆检测内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)含量。术后7天处死其余大鼠,计算各组皮瓣成活面积并取成活皮瓣组织进行常规HE染色后观察炎性细胞数量、微血管计数等。结果:大体观察:三组大鼠,每组7只。A组(天然水蛭素组)1只术后第五天麻醉意外死亡,其余大鼠均无死亡,皮瓣术后无感染。B组(重组水蛭素组)大鼠均无死亡,1只术中操作不当,皮瓣术后发生大面积感染并坏死(将其剔除),其余皮瓣术后无感染。C组大鼠均无死亡,皮瓣术后无感染。A、B两组术后精神状态好于对照组,进食时间较对照组早。术后即时,三组皮瓣外观无明显差别,术后第3天,三组皮瓣远端均出现面积不同的色泽变化,皮瓣淤血坏死区域与成活区域界限开始出现。A组与B组无明显差异,B组淤血面积大于A组(P>0.05),差异无统计学意义。C组淤血面积大于A、B两组(P>0.05),差异无统计学意义。术后第5天,三组皮瓣远端淤血坏死区域与成活区域界限较术后第3天显著,并向近端蔓延。B组与A组无明显差异,B组淤血面积大于A组(P>0.05),差异无统计学意义;C组(对照组)淤血面积大于A、B两组(P>0.05),差异无统计学意义。术后第7天,三组皮瓣远端坏死区域稳定,成活与坏死界限较清楚,A和B组无明显差异, B组淤血面积大于A组(P>0.05),差异无统计学意义,C组坏死面积大于A、B两组(P<0.05),差异有统计学意义。组织学观察:术后即时,三组无明显差别。术后7天, A、B两组皮肤结构尚清晰,轻度水肿真皮下微血管较多优于C组。术后第7天皮瓣成活率的测定:术后7天A组皮瓣成活率为(95.19±4.53)%,B组皮瓣成活率为(95.47±3.65)%,对照组C组皮瓣成活率为(87.59±3.34)%。A、B两组皮瓣成活率显著高于对照组C组,P<0.05,差异有统计学意义;A组皮瓣成活率高于B组,P>0.05,差异无统计学意义。皮瓣组织ET-1含量测量:术后即时,术后第3天A、B、C三组皮瓣组织ET-1含量无显著区别,P>0.05,差异无统计学意义。术后第5天,A组皮瓣组织ET-1含量为157.49±42.03 pg/ml, B组为170.07±35.67 pg/ml,对照组C组为218.64±43.77 pg/ml,对照组皮瓣组织ET-1含量高于A、B两组,P<0.05,差异有统计学意义。A组皮瓣组织ET-1含量低于B组,P>0.05,差异无统计学意义。术后第7天,A组皮瓣组织ET-1含量为114.32±33.04 pg/ml, B组为130.25±26.19 pg/ml,对照组C组为261.53±22.01 pg/ml,对照组C组皮瓣组织ET-1含量高于A、B两组,P<0.05,差异有统计学意义。A组ET-1含量低于B组,P>0.05,差异无统计学意义。皮瓣组织TXB2含量测量:术后第3天、第5天,A组皮瓣组织TXB2含量分别为60.36±47.03 pg/ml, 78.87±51.13 pg/ml, B组皮瓣组织TXB2含量分别为55.54±26.61 pg/ml,61.02±25.28 pg/ml,对照组C组皮瓣组织TXB2含量分别为137.36±71.96 pg/ml,140.13±43.77 pg/ml,对照组皮瓣组织TXB2含量高于A、B两组皮瓣组织TXB2含量,P<0.05,差异有统计学意义。A组皮瓣组织TXB2含量高于B,P>0.05,差异无统计学意义。结论:局部应用天然及重组水蛭素使大鼠随意皮瓣淤血模型移植后皮瓣中ET、TXB2降低。由此推断天然及重组水蛭素对随意皮瓣移植后静脉淤血可能有改善作用。天然及重组水蛭素对静脉淤血效果比较,两者间无明显差异。可能与用药剂量、时间、浓度等相关因素有关。这些和水蛭素改善静脉淤血具体机制等,尚需进一步的研究。
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