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目的:探讨TLR-4对肺癌细胞PD-L1表达的影响及其分子机制。方法:1.选用人肺腺癌A549细胞作为研究对象,分别给予不同浓度脂多糖(LPS0.5ug/ml、1.0ug/ml、2.0ug/ml)刺激24h,收集细胞总蛋白,免疫印迹法检测TLR-4、PD-L1蛋白表达水平。2.脂多糖(1.0ug/ml)分别刺激A549细胞0、15min、30min、1h、2h、4h,免疫印迹法检测P-ERK1/2、P-AKT蛋白磷酸化水平。3.分别给予不同浓度ERK通路抑制剂(PD98059 5umol/l、10umol/l、20umol/l)、PI3K通路抑制剂(LY294002 12.5umol/l、25umol/l、50umol/l)预处理A549细胞1h,再用脂多糖(1.0ug/ml)刺激30min,免疫印迹法检测P-ERK、P-AKT蛋白磷酸化水平。4.分别使用上述相同浓度ERK、PI3K通路抑制剂预处理A549细胞1h,脂多糖(1.0ug/ml)分别刺激8h、24h,分别检测PD-L1mRNA及蛋白表达水平。结果:1.不同浓度LPS刺激A549细胞24h后,LPS刺激组TLR-4、PD-L1蛋白表达较空白对照组明显上升,具有统计学意义(P<0.05),在1.0ug/ml时TLR-4、PD-L1表达均达峰值。2.LPS刺激549细胞细胞0、15min、30min、1h、2h、4h后,LPS刺激组P-ERK、P-AKT蛋白磷酸化水平较空白对照组均明显升高,P-ERK、P-AKT均在30min时磷酸化最显著。3.A549细胞加入不同浓度ERK通路抑制剂(PD98059 5umol/l、10umol/l、20umol/l)、PI3K/AKT(LY294002 12.5umol/l、25umol/l、50umol/l)通路抑制剂预处理1h后,抑制剂+LPS处理组较LPS处理组P-ERK、P-AKT磷酸化水平明显下降,具有统计学意义(P<0.001),且存在浓度依赖性。4.上述相同浓度抑制剂处理A549细胞1h,后LPS处理8h、24h,PD98059+LPS处理组PD-L1mRNA及蛋白表达较LPS处理组明显下降,具有统计学意义(P<0.05),LY294002+LPS组较LPS刺激组无明显变化,无统计学差异。结论:1.TLR-4可以上调肺癌细胞PD-L1蛋白的表达。2.TLR-4通过ERK通路上调肺癌细胞PD-L1的表达。