宫颈癌和子宫内膜癌是常见的两种妇科肿瘤,患病和死亡人数逐年增高。放射治疗（放疗）是宫颈癌和子宫内膜癌主要的治疗手段,但放疗也会导致阴道放射性损伤。阴道微生物群（Vaginal microbiota,VM）是人体共生细菌群落之一,乳杆菌主导的VM对妇科健康产生着重要的影响。放射线可能会破坏乳杆菌在VM中的主导地位,引发的其他厌氧菌增殖,进一步加重放射性损伤。研究表明,益生菌制剂可以通过调节菌群紊乱和恢复微环境稳态等方式,减轻放疗导致的口腔及肠道粘膜损伤。但目前为止,尚缺少关于放疗后阴道粘膜损伤的特征性VM变化研究,也缺少应用益生菌辅助放射治疗对患者阴道黏膜损伤影响的临床研究。目的:测试益生菌德氏乳杆菌乳亚种DM8909（Lactobacillus delbrueckii subsp.lactis,L.del）是否可以减轻妇科肿瘤放疗期间的VM紊乱和放射性损伤,并探索VM变化与阴道放射性损伤之间的关系。探究L.del对宫颈癌细胞的直接抑制作用及其潜在机制。方法:1)分别收集对照组（接受常规放疗）及L.del干预组（接受放疗+L.del活菌制剂联合治疗）患者治疗前和治疗后阴道分泌物样本,并在采样时诊断阴道放射性损伤程度。2)对阴道分泌物样本进行妇科常规检测、乳杆菌绝对定量和16S-rRNA高通量测序。3)分析16S-rRNA测序数据和乳杆菌绝对定量结果,阐明常规放疗或L.del干预治疗对VM的影响,通过比较分析L.del干预产生的效果。4)结合16S-rRNA测序和阴道放射性损伤等级数据,寻找与放射性损伤结局相关的菌群特征,通过比较分析L.del纠正放射损伤相关菌群紊乱和预防放射性损伤的能力。5)记录L.del生长特性并分离细菌各组分,利用宫颈癌Si Ha细胞进行MTT实验,探究L.del各组分对宫颈癌细胞生长增殖的影响。6)通过克隆形成实验,确定L.del胞质对Si Ha细胞的影响。利用qPCR实验检测L.del胞质处理后Si Ha细胞癌基因和抑癌基因表达情况,探究L.del胞质抑癌机制。7)利用qPCR、Western-blot和流式细胞术等方法,检测L.del胞质对Si Ha细胞凋亡的影响,并探究其潜在机制。结果:1)常规放疗导致VM的系统发育多样性增加,而L.del干预治疗降低了该指数。放疗导致阴道内Lactobacillus含量减少和Brevundimonas等机会性病原体显著增殖,但在L.del干预治疗组中,L.del活菌的应用抑制了上述变化,且降低了Streptococcus和Prevotella等病原体的丰度。2)二级放射性损伤的出现与VM的群落状态类型（Community state types,CST）变化有关,即Brevundimonas丰度的增高以及Brevundimonas和Ralstonia等革兰阴性非发酵菌主导的CST III在放疗后的出现。相比于对照组,L.del活菌的应用能够阻遏放射后CST III出现和Brevundimonas丰度增高。与菌群变化相对应的是,在治疗后,L.del干预组2级放射性损伤比例为10.7%,明显低于对照组的23.1%。3)L.del活菌的应用能够使部分患者阴道中的Lactobacillus含量在放疗后显著增加,引导VM转变为Lactobacillus主导的CSTⅠ,但这些治疗效果在患者间存在巨大差异。进一步将患者以接受放疗的方案（辅助放疗或根治性放疗）分组分析后发现,L.del干预对VM的治疗作用主要体现在接受根治性放疗的患者中。4)提取平台期末的L.del各组分,作用宫颈癌Si Ha细胞48 h。通过MTT实验发现,仅有L.del胞质具有显著的抑癌效果。5)克隆形成实验进一步确定,L.del胞质浓度依赖性地抑制了Si Ha细胞的增殖。qPCR实验则显示,L.del胞质同时下调癌基因HPV16-E6、HPV16-E7、IL6和MAP7表达,并上调抑癌基因BAX、Caspase-3、Caspase-9和LTF。6)qPCR、Western-blot和流式细胞术等方法共同显示,L.del胞质上调了BAX/BCL2的比例、促进了Caspase-9和Caspase-3的表达,导致Si Ha细胞的早期凋亡增加。结论:1)L.del的应用可以缓解由放射治疗引起的阴道微生物群紊乱。2)放射诱发的阴道粘膜损伤与阴道微生物群的特征性改变有关,具体体现为微生物群中Lactobacillus减少和革兰阴性非发酵菌增多。L.del的应用抑制了放疗诱导的阴道粘膜损伤和阴道微生物群特征改变,并恢复Lactobacillus在阴道微生物群中的主导地位。此外,这些治疗效果在根治性放疗患者身上表现得更为显著。3)L.del的胞质通过激活线粒体途径凋亡、调控癌基因和抑癌基因表达,浓度依赖性的抑制宫颈癌细胞系Si Ha在体外的增殖。