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研究背景卵巢癌是女性生殖系统中病死率最高的恶性肿瘤,2016年全球各国及各地区约新发卵巢癌254,000例,死亡165,000例。由于卵巢癌起病隐匿,缺乏特异性早期诊断方法,大部分患者在确诊时已为晚期。因此,探索有效的分子治疗靶点,并在此基础上寻找理想的治疗药物对于改善卵巢癌患者预后具有重要意义。解耦连蛋白2（uncoupling protein 2,UCP2）是一种线粒体转运蛋白,属于线粒体内膜阴离子载体蛋白超家族UCPs的一员。UCP2可通过介导线粒体内膜质子漏,降低线粒体膜电位,减少超氧阴离子的产生,负性调节细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,保护肿瘤细胞免受氧化应激影响,促进肿瘤细胞增殖。在胃腺癌、乳腺癌中,UCP2高表达与患者不良预后相关。然而,目前尚无研究探讨卵巢癌中UCP2的表达情况及其临床意义。京尼平、（Genipin）是从栀子、杜仲等传统中药中提取的一种天然环烯醚萜类化合物,现代药理研究认为其具有抗菌抗炎、抗氧化、抗血管生成、抗肿瘤等多种作用。研究发现,在胰腺癌与结肠癌中,Genipin可通过抑制UCP2的表达,促进ROS产生,诱导肿瘤细胞凋亡。然而,目前尚无研究探索Genipin对卵巢癌生物学行为的影响。本研究首次探究UCP2在卵巢癌中的表达情况以及天然药物Genipin对卵巢癌恶性生物学行为的影响,为丰富卵巢癌的诊断与治疗手段提供理论基础。目的探讨UCP2在上皮性卵巢癌中的表达水平与临床意义并探索Genipin对于卵巢癌细胞系中UCP2表达水平以及细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡的影响。方法1.采用免疫组化检测60例上皮性卵巢癌患者组织切片中UCP2的表达水平,分析UCP2的表达水平与临床病理参数的相关性;2.采用qRT-PCR与Western Blotting检测UCP2在卵巢癌细胞系OVCAR3、SKOV3、A2780及正常卵巢上皮细胞IOSE80中的表达水平;3.采用CCK-8法检测梯度浓度的Genipin对卵巢癌SKOV3与A2780细胞活力的影响并计算Genipin对SKOV3与A2780细胞的IC50值并用于后续试验;4.采用 qRT-PCR 与 Western Blotting 检测 Genipin 对卵巢癌 SKOV3 与 A2780细胞UCP2表达的影响;5.采用平板克隆实验与EdU实验检测Genipin对卵巢癌SKOV3与A2780细胞增殖能力的影响;6.采用Transwell实验与Boyden实验检测Genipin对卵巢癌SKOV3与A2780细胞迁移与侵袭能力的影响;7.采用FITC Annexin V/PI流式法检测Genipin对卵巢癌SKOV3与A2780细胞细胞凋亡的影响;8.采用DCFH-DA法检测Genipin以及NAC预处理后使用Genipin对卵巢癌SKOV3与A2780细胞的ROS水平;9.采用qRT-PCR检测Genipin以及NAC预处理后使用Genipin处理卵巢癌SKOV3 与 A2780 细胞后 Bax、Bcl-2、Caspase3 mRNA 的表达水平;10.采用Western Blotting检测Genipin以及NAC预处理后使用Genipin处理卵巢癌 SKOV3 与 A2780 细胞后 Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase3、p-p38MAPK蛋白的表达水平。结果1.UCP2在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为63.3%,其表达水平与FIGO分期相关;2.UCP2在卵巢癌OVCAR3、SKOV3、A2780三株卵巢癌细胞系中的表达水平高于正常卵巢上皮细胞IOSE80,三株卵巢癌细胞中SKOV3与A2780细胞中表达较高;3.Genipin呈浓度依赖方式抑制卵巢癌SKOV3与A2780细胞活力;4.Genipin可显著抑制SKOV3与A2780细胞中UCP2的mRNA与蛋白表达水平;5.平板克隆与EdU实验结果显示Genipin显著抑制卵巢癌SKOV3与A2780细胞的增殖能力;6.Transwell实验与Boyden实验显示Genipin显著抑制卵巢癌SKOV3与A2780细胞的迁移与侵袭能力;7.FITC Annexin V/PI结果显示Genipin显著促进SKOV3与A2780的细胞凋亡;8.DCFH-DA结果显示Genipin显著促进卵巢癌SKOV3与A2780细胞的ROS水平,NAC预处理可逆转Genipin对卵巢癌SKOV3与A2780细胞ROS 水平的促进作用;9.qRT-PCR结果显示,Genipin作用于卵巢癌SKOV3与A2780细胞后Bax、Caspase3 mRNA的表达增加、Bcl-2的mRNA表达降低,NAC预处理可逆转Genipin对于Bax、Bcl-2、Caspase3 mRNA的表达调节而不影响Genipin对于UCP2 mRNA的表达抑制;10.Western Blotting结果显示,Genipin作用于卵巢癌SKOV3与A2780细胞后Bax、cleaved-Caspase3、p-p38MAPK蛋白的表达增加而Bcl-2的蛋白表达降低,NAC 预处理可逆转 Genipin 对于 Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase3、p-p38-MAPK的蛋白表达调节而不影响Genipin对于UCP2蛋白的表达抑制。结论1.UCP2在上皮性卵巢癌中的表达水平与FIGO分期相关;2.Genipin可抑制卵巢癌SKOV3与A2780细胞的增殖能力;3.Genipin可抑制卵巢癌SKOV3与A2780细胞的侵袭与迁移能力;4.Genipin可促进卵巢癌SKOV3与A2780细胞凋亡,且其促凋亡作用可能与抑制UCP2从而激活ROS/p38MAPK信号通路相关。