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第一部分circ-sirt1、sirt1和mi R-132-3p/mi R-212-3p胃癌组织和血清中的表达分析目的:通过检测circ-sirt1、sirt1、mi R-132-3p/mi R-212-3p在胃癌组织和癌旁组织、患者血清和正常人血清中的表达情况,分析这些基因表达与胃癌的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR（Real-time fluorescence quantification PCR,RT-q PCR）法检测20对胃癌组织及配对癌旁组织、术前血清和10例健康受试者健康血清中circ-sirt1、sirt1、mi R-132-3p和mi R-212-3p的水平。结果:1.circ-sirt1在胃癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织（P＜0.05）,在胃癌患者术前血清中的水平显著低于健康受试者血清（P＜0.05）。2.sirt1在胃癌组织中的m RNA水平显著低于癌旁组织（P＜0.05）。3.mi R-132-3p和mi R-212-3p在胃癌组织中的表达均高于癌旁组织（P＜0.01,P＜0.01）,二者在胃癌患者血清中的水平均显著高于健康人血清（P＜0.001,P＜0.01）。结论:circ-sirt1和sirt1在胃癌组织和胃癌患者血清中均呈低表达。mi R-132-3p和mi R-212-3p在胃癌组织和胃癌患者血清中均呈高表达。提示,circ-sirt1、sirt1、mi R-132-3p/mi R-212-3p与胃癌相关。第二部分circ-sirt1/mi R-132-3p/mi R-212-3p/sirt1轴对胃癌细胞生物学功能的影响目的:通过细胞实验分析过表达circ-sirt1对胃腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并阐明其是否是通过影响mi R-132-3p、mi R-212-3p和sirt1的表达发挥作用。方法:1.利用RT-q PCR法检测人胃腺癌细胞株AGS-1、BGC-823和正常人胃黏膜细胞株GES-1细胞中circ-sirt1表达。2.构建含有编码circ-sirt1序列的pc DNA3.1质粒（circ-sirt1质粒）,并测序验证。3.BGC-823和AGS-1细胞中分别转染空质粒（pc DNA3.1）和circ-sirt1质粒（circ-sirt1）、分别转染ASO-mi R-132-3p+ASO-mi R-212-3p（ASO）和阴性对照组（ASO-NC）,RT-q PCR法验证转染效果。4.采用平板克隆实验检测各组胃癌细胞的增殖能力。5.采用Transwell迁移小室和Transwell侵袭小室分别检测各组胃癌细胞的迁移和侵袭能力。6.利用RT-q PCR法检测各组胃癌细胞中mi R-132-3p和mi R-212-3p水平。7.采用平板克隆实验检测各组胃癌细胞的增殖能力8.采用Transwell迁移小室和Transwell侵袭小室分别检测各组胃癌细胞的迁移和侵袭能力。9.利用RT-q PCR法和western blot法检测各组胃癌细胞BGC-823中sirt1的m RNA和蛋白表达量。结果:1.人胃腺癌细胞AGS-1和BGC-823中circ-sirt1的表达显著低于正常胃粘膜细胞GES-1（P＜0.05,P＜0.05）。2.circ-sirt1组AGS-1和BGC-823中circ-sirt1表达均显著高于blank组和pc DNA3.1组（P＜0.001,P＜0.001）。3.circ-sirt1组AGS-1和BGC-823细胞的增殖能力均显著低于blank组和pc DNA3.1组（P＜0.05,P＜0.01）,迁移能力均显著低于blank组和pc DNA3.1组（P＜0.05,P＜0.05）,侵袭能力均显著低于blank组和pc DNA3.1组（P＜0.01,P＜0.001）。4.circ-sirt1组BGC-823和AGS-1细胞中mi R132-3p和mi R-212-3p水平显著低于blank组和pc DNA3.1组（P＜0.05,P＜0.01）。5.ASO组BGC-823和AGS-1细胞中mi R-132-3p和mi R-212-3p表达量低于blank组和ASO-NC组（P＜0.01,P＜0.01）。6.ASO组AGS-1和BGC-823细胞的增殖能力均显著低于blank组和ASO-NC组（P＜0.01）;ASO组AGS-1和BGC-823细胞的迁移能力均显著低于blank组和ASO-NC组（P＜0.001）;ASO组AGS-1和BGC-823细胞的侵袭能力均显著低于blank组和ASO-NC组（P＜0.001）。7.ASO组AGS-1和BGC-823细胞中sirt1的m RNA和蛋白水平显著高于blank组和ASO-NC组（P＜0.01,P＜0.01）。8.与blank组和pc DNA3.1组相比,circ-sirt1组BGC-823细胞中sirt1的m RNA和蛋白水平均显著升高（P＜0.05,P＜0.01）;转染mi R-132-3p/mi R-212-3p mimics可逆转circ-sirt1过表达导致的sirt1表达增高（P＜0.01,P＜0.01）。结论:1.过表达circ-sirt1可抑制胃腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。2.过表达circ-sirt1可降低mi R-132-3p和mi R-212-3p水平,上调sirt1水平。3.mi R-132-3p和mi R-212-3p介导circ-sirt1对sirt1的调控。第三部分过表达circ-sirt1对胃癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响目的:通过构建裸鼠皮下移植瘤模型在体内进一步验证circ-sirt1/mi R-132-3p/mi R-212-3p/sirt1轴对胃腺癌细胞增殖的影响。方法:1.通过G418筛选构建稳定转染circ-sirt1的BGC-823细胞系（BGC-823-circ-sirt1）和空质粒组（BGC-823-pc DNA3.1）,RT-q PCR法进行验证。2.裸鼠成瘤:分别于BALB/c-nu品系雌性小鼠过表达组（n=6）和对照组（n=6）的腋窝皮下接种注射BGC-823-circ-sirt1细胞和BGC-823-pc DNA3.1细胞。3.采用RT-q PCR法和western blot法检测裸鼠瘤组织中circ-sirt1、mi R-132-3p、mi R-212-3p和sirt1表达水平。结果:1.circ-sirt1组中circ-sirt1的表达显著高于pc DNA-3.1组（P＜0.01）,成功构建稳转细胞系。2.过表达组肿瘤体积重量小于对照组（P＜0.05）。3.过表达组mi R-132-3p和mi R-212-3p表达显著低于对照组（P＜0.05,P＜0.01）,sirt1的m RNA和蛋白表达均显著高于对照组（P＜0.01）。结论:1.过表达circ-sirt1能够明显抑制胃癌细胞的体内成瘤能力。2.circ-sirt1过表达的移植瘤中,mi R-132-3p、mi R-212-3p表达降低,sirt1的m RNA和蛋白表达升高。