节节草活性成分的提取分离及抗氧化、抑菌研究

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节节草为木贼科植物节节草的干燥地上部分,在我国各地分布广泛,具有降压、镇痛、保护血管内皮细胞及抗肿瘤等作用。目前国内外有关节节草有效成分提取、纯化工艺研究的资料较少。本文以节节草为原料,分别对总黄酮、多糖及生物碱类化合物的提取、分离纯化及生物活性进行研究,并对该三类成分进行了定性和定量分析,为进一步开发利用节节资源提供理论依据。主要研究内容及结果如下:1、对总黄酮的提取条件进行优化,考察总黄酮对羟自由基的清除效果及不同时间、温度下对油脂氧化的抑制作用。结果表明:当在乙醇体积分数45%、料液比(节节草粉末质量∶乙醇体积,g/mL)1∶30、超声时间30min、超声温度60℃的最佳条件下,节节草中总黄酮的得率为1.16%。黄酮提取物对羟自由基清除率随浓度的增大而升高,对植物油脂的抑制效果优于动物油脂。2、选用D-101树脂对总黄酮进行分离分析。结果表明,树脂对黄酮的吸附等温线符合Langmuir方程,吸附动力学规律可用二级速率方程表示。D-101树脂纯化节节草总黄酮的工艺参数为:黄酮质量浓度为2.00mg/mL、pH2.1、吸附料液比(树脂质量∶吸附液体积,g/mL)1∶20、静置时间60min、50.0mL95%乙醇溶液为洗脱剂时,洗脱率达到99.01%。纯化后,黄酮质量分数从10.54%提高到60.01%。3、通过单因素及正交试验,确定多糖最佳超声提取工艺为:料液比(节节草粉末质量∶水体积,g/mL)1∶25、超声温度65℃、超声波时间60min、提取次数2次。此条件下,多糖的得率为1.01%。D-101大孔树脂分离纯化节节草多糖的吸附行为实验结果表明:pH为6.0时,料液比(树脂质量∶吸附液体积,g/mL)为1∶10、浓度为2.00mg/mL的多糖溶液吸附较好;吸附过程符合Freundlich方程;吸附热力学参数表明该吸附过程是一个吸热、熵增加过程;吸附动力学规律可用一级速率方程表示。4、提取节节草多糖并进行纯化,分别研究了多糖粗品及纯化品的体外抗氧化活性和对油脂氧化的抑制作用。结果显示:两种多糖对羟基自由基、超氧自由基及亚硝酸盐均具有清除能力,其效果与多糖浓度有一定关系,多糖粗品的清除能力强于纯化品,对油脂氧化有显著的抑制作用。5、探讨总生物碱的最佳提取条件,并进行体外抑菌性研究。结果表明:用1.25%的盐酸为溶剂、料液比为1∶14(节节草粉末质量∶盐酸体积,g/mL)、在90℃的水浴中浸提3次,总生物碱提取率为9.53%。节节草总生物碱对奇异变形杆菌、大肠杆菌、藤黄微球菌、黑曲霉菌具有强的抑菌作用。
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