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菜心是十字花科芸薹属白菜种的一种重要蔬菜,是华南地区栽培面积和上市量均最大的特产蔬菜。菜心是典型的菜薹类蔬菜,正常抽薹开花是其产品器官形成的必要条件。因此对菜心抽薹开花调控机制的研究历来受到关注。近年研究发现低温对菜心生长发育存在一定程度诱导作用,赤霉素对菜心的抽薹开花亦有促进作用。但有关温度和赤霉素在菜心抽薹开花调控方面的具体分子机制仍鲜有研究。SVP(SHORT VEGETATIVE PHASE)和SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1)基因是植物重要的开花调控因子,能整合包括温敏途径及赤霉素途径在内的多条途径调控植物抽薹开花。因此,本试验选用菜心早熟品种“四九-19号”和晚熟品种“油绿80天”为材料,通过基因克隆、生物信息学分析、亚细胞定位及荧光定量PCR方法研究菜心BcSVP、BcSOC1基因在菜心中的表达特性及对赤霉素和温度的响应特性。主要结果如下:1.利用RT-PCR法克隆得到菜心BcSVP、BcSOC1-1、BcSOC1-2基因,其基因ORF全长分别为727 bp、642 bp、642 bp;BcSOC1-1、BcSOC1-2相似性达到95%。系统进化树分析结果说明BcSVP、BcSOC1-1、BcSOC1-2与十字花科亲缘关系最近。对BcSVP、BcSOC1-1、BcSOC1-2基因编码氨基酸序列进行预测分析,并对这三个基因编码蛋白的结构域、保守模体、二级结构等进行预测,发现其均具有MADS家族典型的结构域MADS-box和K-box,基因功能保守。2.将BcSVP、Bc SOC1-1、BcSOC1-2基因连接到含绿色荧光蛋白的表达载体中构建融合表达载体,并在洋葱表皮中进行瞬时表达,结果表明BcSVP和BcSOC1-2定位在细胞核,而BcSOC1-1主要定位于细胞核,但在细胞质中也有定位。BcSVP、BcSOC1-1、BcSOC1-2基因在菜心根、茎尖、叶片和花中均有表达。其中BcSVP主要在叶片和茎尖中表达;BcSOC1-1在茎尖表达量最高,其次是根和叶片;而BcSOC1-2在根和叶片中表达量均较高,其次是茎尖,这三个基因在花中表达量均较低。3.200 mg/L赤霉素处理显著提高菜心的株高、降低薹粗,并使抽薹、现蕾和开花时间提前。菜心BcSVP基因在现蕾之前相对表达量较高,现蕾之后较低,赤霉素处理使BcSVP表达下调。BcSOC1-1和BcSOC1-2在现蕾之前均以较低水平保持平稳状态,在现蕾之后表达量上升,赤霉素处理下叶片和茎尖中BcSOC1-1、BcSOC1-2表达上调。4.4℃和15℃低温处理均显著提高菜心的株高、降低薹粗,同时提早菜心抽薹、现蕾、开花时间。荧光定量PCR分析发现4℃和15℃处理下BcSVP表达下调,同时上调BcSOC1-1、BcSOC1-2表达。综上所述,赤霉素(200 mg/L)以及低温(4℃、15℃)处理显著提前菜心的抽薹开花时间。赤霉素和低温均通过下调BcSVP表达及上调BcSOC1-1、BcSOC1-2表达,来调控菜心的抽薹开花。