研究背景和目的:食道癌是一种恶性程度高、病程发展快、预后性差的消化道肿瘤,严重威胁人类生命健康。随着食道癌治疗手段不断改进,部分病人的生存质量得以改善,但5年生存率仅有20%左右。目前对于食道癌的细胞起源驱动及发病机制仍知之甚少。在人体中模拟人类癌症和测试临床前治疗策略试验违背伦理审查原则,所以急需建立合适的食道癌动物模型出现。小鼠是生长周期较短的哺乳动物,繁殖能力强,基因水平与人类有高度的同源性,且对小鼠基因编辑技术熟练,因此小鼠模型已经成为食道癌研究中最常用的动物模型。很多关于食道癌基因组的研究,发现一些在食道癌中发挥重要作用的基因,如CCND1,KRAS,TP53及CDKN2A等,这些基因在人类食道癌中变异率较高。在胚胎时期就过表达CCND1可以诱导小鼠食道癌前病变,加上Trp53基因的灭活可以诱导小鼠食道癌。由于人类肿瘤是在成年过程中基因突变不断累积造成的,因此成体动物模型更能模拟人类疾病,然而在成体小鼠中诱导食道癌所需的驱动突变仍是未知。因此我们将在成体小鼠中探索诱导食道癌所需遗传改变,并建立能模拟人类食道癌的成体小鼠食道癌模型,为食道癌的研究提供更好的工具。研究方法:本课题采用慢病毒诱导小鼠食道癌模型。通过查阅文献和TCGA数据库,确定小鼠食道癌模型使用的基因;然后利用分子克隆技术构建慢病毒载体,包装慢病毒;病毒体外感染MEF、HEK293T和TE-1细胞,然后收取细胞提取RNA和蛋白;通过QPCR验证shRNA的敲降效率、Western blot验证蛋白的表达水平,证明慢病毒工作后,将慢病毒注射入小鼠食道壁。待小鼠肿瘤形成后,通过HE和IHC分析肿瘤组织的病理特征和分子特征。在本项目中涉及的研究手段和技术均为众多研究采用并论证为可行、可靠的,并且实验室已经用慢病毒载体成功构建了胰腺癌的小鼠和树鼩模型以及猴脑胶质瘤模型,为本课题提供了科学实验依据及技术支持。研究结果与结论:在本研究中,我们发现在成体小鼠食道表达KRA SG12D及灭活Trp53,Cdkn2a能很好地诱导成体小鼠食道局部癌前病变和食道间质瘤。该小鼠食道癌模型具有类似人类起源于食道基底细胞恶性增生的食道鳞癌癌前病变的主要病理及分子特征。