胎盘特异性蛋白 8（Placenta specific protein 8,PLAC8）是一种高度保守,富含半胱氨酸,有着独特结构并在组织中特异性表达的蛋白。PLAC8在细胞增殖、分化、凋亡、迁移及侵袭等生理过程中发挥着重要的作用。近年来,对PLAC8的研究主要聚焦于肿瘤发生,但是PLAC8在肺癌中的相关研究还很少。前期统计数据显示,在肺癌组织中PLAC8的mRNA表达水平比正常肺组织中低;肺疾病谱组织芯片结果进一步显示,PLAC8蛋白在肺癌组织中的表达水平低于正常肺组织。以上结果提示PLAC8的表达可能与肺癌有关。miR-185-5p是一个具有抑癌基因性质的microRNA,能通过与众多靶基因mRNA的3’UTR结合,抑制mRNA表达翻译或使其降解,从而影响细胞生理活性。生物信息学分析显示PLAC8 mRNA的3’-UTR上有miR-185-5p的潜在结合位点,值得我们进一步去研究。首先我们检测了11株肺癌细胞中PLAC8的表达量,然后选取高表达PLAC8的肺癌细胞H1299,运用CRISPR/Cas9技术构建PLAC8蛋白敲除细胞系;以低表达PLAC8的肺癌细胞A549为实验模型,构建PLAC8过表达细胞系。我们以上述构建的两个细胞系为实验对象,进一步地开展细胞功能实验。结果显示,敲除H1299细胞中的PLAC8影响了相关周期蛋白的表达,其中P2 1waf/cip1、P27kip1和P-wee1蛋白表达水平升高,G1期相关激酶CDK2和CyclinD1、Cyclin D3表达下调,使细胞阻滞在G1期,抑制了细胞的增殖能力。迁移实验结果显示,敲除PLAC8抑制了 H1299细胞的迁移能力。在A549细胞中,过表达PLAC8蛋白抑制了激酶抑制因子P27kip1和P-weel的表达,上调了 G2/M期检验点调节的关键因子cdc2（CDK1）/cyclinB1复合物的表达,cdc2（CDK1）/cyclinB1表达上升使得处于G2/M期的细胞百分比下降,进而促进了细胞增殖。迁移实验结果显示,PLAC8表达上调促进了细胞迁移。进一步在人支气管上皮细胞16HBE中的双荧光素酶活性实验结果显示miR-185-5p与PLAC8的3’UTR结合后抑制了 PLAC8蛋白表达,同时细胞内 S期调控蛋白CDK2-cyclinA2表达下降,使细胞阻滞在S期,抑制了细胞增殖。综上所述,PLAC8可能通过改变一系列细胞周期因子和迁移蛋白的表达来影响A549、H1299和16HBE细胞增殖、周期、迁移在内的一系列生理过程,而miR-185-5p可能是PLAC8上游信号通路中的一环。本论文为研究PLAC8参与肺癌发生发展的分子机制提供了一定的理论基础,并为肺癌的治疗提供了潜在的基因治疗靶点。