葛根标准提取物对去卵巢大鼠骨质疏松作用的研究

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实验目的:探索葛根标准提取物对去卵巢大鼠骨质疏松的作用。实验方法和结果:采用高效液相色谱法建立了指标性成分葛根素的含量测定方法。方法可靠,重现性好,以葛根素为指标性成分,葛根素的提取率、浸膏的得率、葛根提取物对家兔离体血管的舒张率为指标,对提取工艺进行优化。在单因素考察和正交试验结果表明溶剂浓度、提取温度、提取时间和溶剂用量为提取得影响因素。最佳提取工艺为:采用75%乙醇,提取温度为80℃,提取次数为2次,第一次的提取时间为60分钟,溶剂用量为12倍;第二次的提取时间为60分钟,溶剂用量为10倍。对葛根提取物进行谱效学研究,发现色谱峰2号、3号、7号色谱峰的峰面积变化,与离体血管的舒张度有显著的相关性。采用去卵巢大鼠模型模拟骨质疏松模型来评价葛根提取物的药效,从股骨计量学、骨密度、血液生化、尿液生化、骨形态学、子宫病理等方面进行评价。去卵巢导致大鼠体重增加、骨钙含量减少、骨密度和骨硬度下降、血清碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶含量增加、血清雌二醇减少,骨钙素水平升高、尿钙和尿羟脯氨酸排出增加、股骨干重、灰重、湿重显著减少、骨抗弯强度,最大弯曲力下降、骨小梁变细,甚至断裂。说明去卵巢导致大鼠骨钙丢失,形成骨质疏松。手术一个月后,葛根标准提取物连续给药12周,设高、中、低剂量组(给药剂量分别为2.5,1.25,0.625g/kg),模型组,假手术组和阳性药物雌激素组。葛根标准提取物能够显著对抗去卵巢导致的动物体重增加,高、中、低剂量抑制率分别为13.5%、13.1%、9.3%;改善OVX大鼠的股骨计量学指标:高、中、低剂量组分别提高OVX大鼠骨钙含量为26.2%、20.1%、15.7%;提高股骨骨密度、骨硬度;升高股骨干重、灰重、湿重;改善OVX大鼠血液生化、免疫学指标:升高血钙、血磷,降低碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶,提高血清雌二醇水平;降低骨钙素水平。改善OVX大鼠尿液生化指标:降低尿钙、尿羟脯氨酸的排出量。改善OVX大鼠股骨骨生物力学指标:增强股骨抗弯强度和最大弯曲力。并且对子宫的刺激增殖作用弱于雌激素。结论:本文结果提示,葛根标准提取物具有对抗去卵巢导致的骨质疏松的作用。
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