目的:从人脐带中分离、纯化、培养原代脐带间充质干细胞(MSCs),对其表面标志物进行鉴定、传代培养、诱导其向肝样细胞分化。观察分化的肝样细胞和聚酸酐复合载体支架在体外能否共同培养,肝样细胞的生长状态,评价聚酸酐复合载体支架对肝样细胞生物活性的影响。　　 方法:无菌条件下收集剖宫产新生儿脐带,将脐血管经过处理后,在培养皿内剪碎至1mm3,然后移入培养瓶中,待细胞生长至80-90％融合时,按1:3传代培养,取传代培养细胞进行形态学观察、免疫细胞化学染色、流式细胞仪检测其生长活性、并进行细胞周期分析。将第六代的人脐带MSCs接种在放有支架的24孔板上培养,同时设置对照组。A组:人脐带MSCs,加入HGF等诱导因子。B组:人脐带MSCs,不加入任何诱导因子。C组:支架培养的人脐带MSCs,不加入任何诱导因子。D组:与支架培养的人脐带MSCs,加入HGF等诱导因子。在不同诱导阶段收集细胞后观察细胞形态。在诱导4周后取平板细胞上清液进行生化检测,主要项目包括:CYP450的活性、Albumin和尿素的含量。同时支架进行石蜡包埋,进行切片,HE染色观察诱导后的肝样细胞在支架中的生长情况,行免疫组织化学观察肝细胞的表面标志:CK19、AFP、ALB和C-Kit。　　 结果:经组织块培养法可从脐带中获得MSCs,数量约1x108。观察细胞形态为长梭形,不规则形,细胞大小不一,类似成纤维细胞,呈漩涡样生长。取第6-9代细胞行免疫细胞化学染色结果显示细胞强表达CD105、Vimentin,基本不表达CD34、CD31、CD133。经流式细胞仪检测表达CD105(97.4±5％)、CD29(71.1±2.0％),基本不表达造血细胞标志CD34(1.6±0.4％)。MTT实验显示细胞倍增时间为22h。细胞周期分析表明75％-85％细胞处于G0/G1。HE染色结果显示,诱导以后肝样细胞与支架生长良好；检测细胞上清液显示:D组细胞分泌的CYP450(4.205±0.760 pg/ml)、Albumin(0.230±0.035g/dl)、尿素(2.630±0.262 mg/dl)的含量与A、B和C组相比有统计学差异(P<0.05),免疫组织化学显示诱导组支架材料上Album、CK-19、AFP、C-Kit呈阳性反应。　　 结论:经组织块培养法可从脐带中获得间充质干细胞,符合间充质干细胞基本的生物学特性。脐带间充质干细胞在HGF等诱导因子作用下可转化为肝样细胞,初步具备肝细胞特有的功能性特征。肝样细胞与复合载体经过连续30天共同培养,肝样细胞可以很好的贴附于聚酸酐复合载体支架上,细胞增殖活力良好,表面标志物持续表达,比无支架培养的对照组显示出较强的生物学活性。