[背景和目的]B细胞异常改变是干燥综合征(primary Sjogren syndrome, pSS)特征性表现之一。调节性B细胞(Regulatory B cell, Breg)是一组具有抑制免疫应答反应的新成员,在保持机体免疫功能平衡和耐受中具有重要作用。目前关于Breg的研究以动物模型为主,已知的Breg亚群有CD5+B-la细胞、CD19hiCDldhiCD5+B细胞、CD19+CD21hiCD23+CD24hi CD93+T2-MZP Breg细胞以及CD19hiCDldwCD5+B10细胞(IgM+CD21+CD23"CD24hi CD93-)[7]等,分泌IL-10是其发挥免疫调节功能的标志[8-11] Breg在人体中的研究不多；目前发现人外周血CD19+CD24hiCD38hiB细胞[12]具有免疫调节功能；CD19+CD5+Fox3+B细胞可能为潜在的Breg亚群。Breg在pSS发病机制中的作用及其与pSS临床表现方面的关系仍不明确。本研究中,我们尝试评价外周血Breg匕例、CD69、 CD80、 BAFF-R等B细胞活化标记的外周表达在pSS、系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus, SLE)患者及健康对照(Healthy Control, HC)间的差异及其与临床特征的相关性,并对Breg亚群的功能进行探索,尝试解释Breg在pSS发病机制中的作用。[方法]明确pSS诊断患者34例、明确SLE诊断10例,健康对照19例。采集抗凝外周静脉血分离单个核细胞(PBMC)。流式细胞术检测外周血PBMC中Breg (CD19+CD24hiCD38hi)在淋巴细胞及CD19+B细胞中的比例；检测各组CD69、 CD80、 BAFF-R在CD19+B细胞Breg表达百分比及强度。收集患者临床相关资料,按照2009年EULAR干燥综合征疾病活动评分(ESSDAI)评价pSS患者疾病活动度。根据治疗(初治组、免疫抑制治疗组和其他治疗组)、有无口眼干症状、ESSDAI评分及血清IgG水平对pSS患者进行分组。流式细胞分选去除Breg细胞,CD3单抗刺激培养3天后检测去除Breg组和未去除Breg组CD4+IFN-Y+Thl细胞及CD19+IL-10+B细胞表达水平。Elisa法检测细胞培养上清中IL-10、IFN-γ浓度。[结果]1、pSS患者外周血Breg细胞占CD19+B细胞百分比(2.63+2.65%)高于SLE患者(0.93±1.18%,p=0.024)和HC组(1.32±±1.32%,p=0.025)；各治疗组间无显著性变化。初治pSS患者组Breg占CD19+B细胞百分比(3.544±3.01%)高于SLE组(p=0.005)和HC组(p=0.001)。初治pSS患者组Breg占淋巴细胞百分比(0.17±±0.21%)高于免疫抑制治疗组(0.10±±0.15%,p=0.026)和其他治疗组(0.05+0.04%,p=0.032)、SLE组(p=0.000)及HC组(p=0.004)。2、有口干症状患者Breg细胞占淋巴细胞百分比(0.08±0.06%)低于无口干患者(0.25±±0.28%,p=0.029)；占CD19+B细胞百分比前组(1.88±±2.06%)亦显著低于后组(4.62±±3.11%,p=0.004)。有眼干症状患者Breg细胞占淋巴细胞百分比(0.09±±0.11%)低于无眼干症状患者(0.19±0.25%,p=0.014)。轻度活动(ESSDAI≤6)pSS患者和中度以上活动组(ESSDAI>6)间Breg无显著性差异。血清IgG>20g/L组Breg占CD19+B细胞百分比(3.82±3.34%)明显高于IgG≤20g/L组(1.63±1.31%,p=0.045)。3、pSS患者Breg细胞表面BAFF-R表达百分比(87.42±±28.84%)和强度(10065.20±6526.50)均高于SLE组(43.73±±48.19%,p=0.009,2295.35±2580.39,p=0.000),低于HC组(99.38±1.52%,p=0.001,34017.21±56136.49,p=0.010)。4、各治疗分组间Breg细胞表面CD69表达百分比(p=0.008)、强度(p=0.023)、CD80表达强度(p=0.025)、BAFF-R表达强度(p=0.003)均存在显著性差异。免疫抑制治疗Breg细胞表达CD69百分比(p=0.021)、CD80强度(p=0.020)及BAFF-R强度(p=0.038)较初治组均降低。5、初治pSS患者Breg占淋巴细胞百分比与血清C4(p=0.044,R=-0.589)成负相关,与IgA(p=0.044,R=0.546)、IgG(p=0.029,R=0.545)成正相关：Breg占CD19细胞百分比与C4(p=0.030,R=-0.624)成负相关；与IgG(p=0.004,R=0.680)成正相关。6. pSS患者CD19+B细胞表达CD80百分比(9.53±6.61%)低于SLE患者(17.6±11.41%,p=0.033),表达强度(2357.23±320.30)高于SLE患者(2071.38±±218.39,p=0.006)：表达BAFF-R强度(19567.03±±7841.24)高于HC组(72025.89±19532,p=0.010)。pSS患者各治疗组间CD19+B细胞表面CD69、 CD80、 BAFF-R表达百分比及强度无显著性差异。pSS患者CD19+B细胞表达CD69百分比与IgG成正相关(p=0.013,R=0.440)；pSS患者CD19+B细胞表达BAFF-R强度与C3(p=0.030,R=0.462)正相关。7、分选去除Breg培养后CD19+IL-10+细胞百分比降低,CD4+IFN-r+Thl细胞百分比升高,培养上清中IL-10浓度降低,IFN-γ浓度降低。[结论]在pSS患者外周血CD19+B淋巴细胞中Breg表达水平较HC组高,且与患者血清IgG呈正相关；初治组Breg淋巴细胞百分比较免疫抑制组高,推测pSS外周血Breg比例升高预示着病情较重。Breg表面BAFF-R表达百分比、强度均低于HC组。初步检测pSS患者外周血Breg功能基本正常。提示Breg细胞参与pSS的发病,可能在pSS中起抑制过度自身免疫反应的作用。