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不同器官保存液对大鼠无心跳供肝保存效果的比较研究目的：1．建立稳定可靠的重建肝动脉的大鼠肝移植模型。2．比较University of Wisconsin（UW）液、Histidine-tryptophan-ketoghtarate（HTK）液与Celsior（CS）液对大鼠无心跳供体（non-heart-beating donor，NHBD）供肝的保存效果。3．对CS液中添加重组人肝细胞生长因子（recombinant human hepatocyte growth factor，rhHGF）进行了对比研究，探讨rhHGF在CS液中对NHBD供肝的保护作用及可能的机制。方法：大鼠肝移植模型参照目前常用的“二袖套”法加以修改，并利用微支架管重建肝动脉。采用钳夹大鼠胸主动脉与膈上下腔静脉10min的方法来诱导供肝热缺血作为NHBD供肝模型。通过胆汁计量、计算肝组织含水量、自动生化仪测定肝酶水平、荧光发光微量检测技术检测肝组织ATP含量、放免法检测血清ET-1水平、抗体夹心ELISA法检测血清炎性细胞因子TNF-α与IL-1的浓度、常规H&E染色病理组织学检查、透射电镜观察胆管上皮细胞超微结构变化、观察大鼠生存率等多个方面比较上述三种器官保存液在冷缺血时间为8h与16h条件下对NHBD供肝的保存效果，并比较CS液添加rhHGF方案是否能增强其对NHBD供肝的保存效果，并采用TUNEL法检测受体大鼠肝细胞凋亡、抗体夹心ELISA法检测受体大鼠血清中INF-γ、IL-4与IL-10的水平以及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝组织相应细胞因子（INF-γ、IL-4与IL-10）mRNA的表达来探讨rhHGF可能的抗冷热缺血机制。结果：1．我们建立的重建肝动脉的大鼠肝移植模型，3周生存率高达92.1％，肝动脉3周通畅率为91.4％。2．保存8h的NHBD供肝移植后，HTK组与CS组胆汁产生量在门静脉再通1h明显多于UW组（p＜0.05）；各组肝组织含水量在再通1h、3h、6h时间点差异无显著性（p＞0.05）；HTK组与CS组血清ALT与AST水平在门静脉再通1h、3h与6h明显低于UW组（p＜0.05）；UW组肝组织ATP水平在门静脉再通1h与3h明显低于HTK组与CS组（p＜0.05），再通6h则差异无显著性（p＞0.05）；UW组血清ET-1水平在门静脉再通1h与3h明显高于HTK组与CS组（p＜0.05），在再通6h则差异无显著性（p＞0.05）；UW组血清TNF-α与IL-1水平在门静脉再通1h与3h明显高于HTK组与CS组（p＜0.05），在再通6h时间点则差异无显著性（p＞0.05）；与UW组相比，病理组织学检查发现HTK组和CS组保持了相对良好的肝细胞结构、较轻的门静脉充血及炎性细胞的浸润；超微结构显示CS组胆管上皮细胞线粒体肿胀明显比UW组及HTK组轻；生存分析表明UW组、HTK组与CS组的7天生存率分别为25.0％，33.3％和58.3％，HTK组与CS组明显优于UW组（p＜0.05）。3．保存16h的NHBD供肝移植后，三组间在门静脉再通1h、3h与6h的胆汁分泌量、肝组织含水量、血清ALT与AST水平、肝组织ATP含量、血清ET-1水平以及炎性细胞因子TNF-α和IL-1水平差异均无显著性（p＞0.05）；病理组织学检查发现三组肝组织损伤程度无明显差别，均出现严重的肝细胞变性坏死、肝窦淤血、门静脉充血、炎性细胞浸润等；所有受体均在3天内死亡，三组生存分析差异无显著性（p＞0.05）。4．添加rhHGF的CS液试验组在门静脉再通1h的胆汁产生量以及肝组织ATP含量明显高于对照组（p＜0.05）；肝组织含水量以及血清ALT与AST水平明显低于对照组（p＜0.05）；肝组织损伤在肝细胞变性坏死、肝窦扩张、门静脉充血、炎性细胞浸润等方面明显较对照组减轻；试验组肝细胞凋亡明显减少；血清INF-γ水平明显低于对照组（p＜0.05），IL-4与IL-10水平明显高于对照组（p＜0.05）；肝组织INF-γmRNA表达明显低于对照组（p＜0.05），IL-4 mRNA与IL-10 mRNA表达明显高于对照组（p＜0.05）；生存分析表明试验组的1周生存率明显高于对照组（p＜0.05）。结论：1．该重建肝动脉的大鼠肝移植模型稳定可靠。2．在NHBD供肝冷保存8h的条件下，HTK液以及CS液对NHBD供肝具有比UW液更好的保护作用。CS液也许更有利于减轻NHBD供肝胆管上皮细胞的缺血再灌注损伤。3．在NHBD供肝冷保存16h的条件下，UW液、HTK液以及CS液对NHBD供肝的保存效果均差。采用上述三种保存液灌注保存NHBD供肝时冷保存均不宜超过16h。4．rhHGF可明显增强CS液对NHBD供肝的保存效果。5．rhHGF具有抗冷热缺血作用，该作用可能与其减轻冷热缺血导致的炎症反应，减少肝细胞的凋亡，并后续直接或间接地逆转Th1／Th2型细胞因子产生的比率有关。