慢性疲劳综合征大鼠生殖及胚胎发育的实验研究

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目的:在中医“劳则气耗”理论指导下,通过采用中医的“神劳”、“形劳”模拟心理及躯体的复合应激因素,研制与慢性疲劳综合征(CFS)临床表现近似的慢性疲劳动物模型;并观察动物的一般情况、生殖情况、分析胚胎发育指标、检查有无外观畸形,以探讨CFS状态对生殖功能及胚胎发育的影响;从而深入了解CFS这一疾病,并揭示疲劳与形体、精气和脾、肾等脏腑功能的密切关系,并证实慢性疲劳综合征是一种涉及多脏腑、多系统功能失调的疾病,为中医理论指导治疗CFS提供实验依据。同时为优生优育提供实验理论依据,为寻觅和开发能够有效治疗CFS的民族医药提供新的实验理论依据和思路方法。   方法:选用SD雌性大鼠30只,雄性大鼠15只;雌鼠随机分为2组,即:正常对照组(正常组)、慢性疲劳组(模型组);正常对照组10只,慢性疲劳组20只。除模型组外,其余各组均正常饲养,不作处理。模型组动物予每日上午力竭游泳,水温(28±1)℃;下午随机给予冷水游泳10min(水温4℃)或夹尾刺激(刺激时间不固定);每日夜间至次日晨予12h束缚刺激,造模时间共14天;且于造模前及造模结束后行旷场实验及力竭游泳实验,检测动物精神行为及体能情况。造模结束后,模型组、正常对照组随机按雌雄比例2∶1比例与雄鼠合笼,合笼次日检测雌鼠阴道栓并作阴道精子涂片检查,如阴道涂片检查检出雌鼠阴道内有精子,即记为孕0天;如雌鼠阴道内未见精子则继续合笼。合笼时间共5天(大鼠4~5天为一个动情周期),合笼期间各组均不作处理。合笼结束后,于孕第5天仍给予模型组合笼前处理,其余各组仍自然饲养。时间共计19天,于雌鼠孕第20天麻醉处死。实验中作行为学、血清雌孕激素、总SOD活性、MDA含量、平均妊娠胚胎数、畸胎数、死胎数、吸收胎数及平均活胎数等指标检测。   结果:①正常对照组在造模阶段未作干预,该组动物自然生长,体重增长明显,与造模前相比具有统计学差异;模型组在实验过程中体重有小幅下降,但与造模前比较无统计学差异;造模后两组大鼠体重出现明显差异。②正常对照组在造模阶段未作干预,该组动物自然生长,造模前后旷场实验测定及力竭游泳时间无统计学差异;模型组造模前与造模后相比,旷场实验测定及力竭游泳时间均具有统计学差异;造模后正常对照组与模型组力竭游泳时间、旷场实验测定(水平运动及垂直运动次数)均出现统计学差异。③正常对照组及模型组大鼠在实验合笼期间均未作处理,自然饲养,按雌雄比例2∶1合笼交配受孕;模型组较正常对照组大鼠妊娠后血清中雌二醇(E)与孕酮(P)水平偏低,但无统计学差异。④模型组大鼠血清中的总SOD活性降低、MDA含量增高与正常对照组相比有统计学差异。⑤模型组大鼠平均妊娠胚胎数及平均活胎数低于正常对照组,且两组间有统计学差异,而模型组大鼠平均畸胎数、死胎仔数及平均吸收胎数高于正常对照组,但无统计学差异。⑥与正常对照组比较,模型组胎鼠平均体重、平均体长及平均尾长未见显著性差异。⑦病理切片:模型组动物子宫内膜层变薄,被覆上皮成乳头状突起,子宫腺无明显管腔;卵巢有不同程度出血倾向;肾上腺皮质不同程度增厚。   结论:①CFS大鼠的一般状况变化显著,如:体重增长缓慢、精神萎靡不振,眯眼懒动、饮食饮水量下降、大便稀、皮毛凌乱无光泽、缩肩拱背、逃避反应能力下降等症候。   ②CFS大鼠血清中总SOD活性、MDA含量、平均妊娠胚胎数、活胎数与空白对照组比较,具有统计学差异;说明CFS动物机体自身保护能力(抗自由基)及生殖功能已开始下降。   ③本实验通过对CFS动物的生长、生殖及胚胎发育等观察研究,验证了疲劳与形体、精气和脾、肾等脏腑功能有着密切关系。
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