该论文致力于运用分子信标技术,对广谱恶性肿瘤标志物—端粒酶活性的进行实时定量检测的方法研究.开发了两类新型探针引物,建立了五种实时定量检测端粒酶活性的方法.并以合成的寡核苷酸或恶性肿瘤细胞提取液为检测对象,对上述方法的检测效果进行了评估.全文共分五章:1.绪论部分对分子信标技术、端粒酶及其活性检测方法进行了评述,同时指出该论文的设计思路及创新之处.2.针对端粒酶延伸产物序列的特殊性,开发了一类探针引物—复合式蝎形引物.并以合成的寡核苷酸代表端粒酶延伸产物,对其进行了实时定量检测.3.选择了两种最具代表性的端粒酶活性检测方法,用复合式蝎形引物代替原方法中的上游引物,建立了两种实时定量检测细胞中端粒酶活性的新方法.4.针对端粒酶活性检测需要"热启动"的特点,开发了两类新型引物—发夹型引物和锚式发夹型引物.同时,与复合式蝎形引物一起,建立了两种实时定量检测细胞中端粒酶活性的快速方法,该法可在双温快循环PCR条件下完成检测.5.开发了一类单标记、发夹结构的荧光引物.建立了荧光引物实时定量检测细胞中端粒酶活性的新方法.最后,从探针的特异性、定量的线性范围、反应时间及试剂的成本等方面对上述五种方法及文献报道的方法进行了比较.