论文部分内容阅读
目的:鼻黏膜上皮屏障作为机体免疫防御的第一道防线,与变态反应的发生、进展和好转密切相关。鼻黏膜上皮屏障的破坏可能是变应性鼻炎发病的重要环节,恢复屏障结构和功能的完整性或许是治疗变应性鼻炎的有效方法。由此我们猜想穴位埋线对变应性鼻炎的疗效,可能与其对鼻黏膜上皮屏障的正向调节有关。紧密连接位于两个上皮细胞相邻面的顶端并对基底外侧膜间的空隙进行封闭,对黏膜屏障功能起决定性作用。本研究从鼻黏膜上皮细胞紧密连接着手,推测鼻黏膜屏障功能改变,探求穴位埋线对变应性鼻炎良好疗效的机制。并根据Claudin-1和Occludin的表达情况寻求紧密连接变化可能的机制。方法:采购40只健康的SD大鼠,随机分配于空白组、AR模型组、丙酸氟替卡松组、穴位埋线组、假埋线组,每组8只。除空白组以外的所有大鼠均依照卵清蛋白造模法制备AR大鼠模型。模型完备后,AR模型组和空白组不予干预;丙酸氟替卡松组以丙酸氟替卡松干预,每日1次,连续2周;穴位埋线组迎香穴(LI20)埋线,每周1次,连续2周;假埋线组行埋线假动作,不埋线,时间同埋线组。对大鼠AR相关行为学打分并记录,ELISA法检测大鼠血清s Ig E,HE染色后光镜下观察鼻黏膜炎性反应变化,透射电镜下观察鼻黏膜上皮细胞紧密连接和内质网超微结构同时测定紧密连接的宽度,WB法测定紧密连接蛋白Claudin-1和Occludin的表达。结果:1.大鼠AR相关行为学评分结果:和空白组比较,AR模型组、假埋线组变应性鼻炎相关症状评分之和明显升高,具有统计学意义(P<0.05);和AR模型组、假埋线组比较,穴位埋线组和丙酸氟替卡松组评分都明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),组间无明显差异(P>0.05)。2.ELISA检测血清s Ig E结果显示:AR模型组与假埋线组结果均显示血清s Ig E水平明显升高,组间无明显差异(P>0.05)。而穴位埋线组与丙酸氟替卡松组均能明显降低血清s Ig E值(P<0.05),组间无明显差异(P>0.05)。3.光镜下鼻黏膜组织HE染色显示:模型组、假埋线组鼻黏膜纤毛排列杂乱、倒落,出现较多淋巴细胞和嗜酸性粒细胞,黏膜下腺体增生明显。与模型组相比,穴位埋线组和丙酸氟替卡松组炎症反应较轻。4.透射电镜下上皮细胞间紧密连接:空白组紧密连接呈连续的狭窄带;模型组和假埋线组紧密连接严重破坏,呈不规则扩张,连续性中断,紧密连接宽度增大(P<0.05);穴位埋线组与丙酸氟替卡松组紧密连接趋于规则,宽度较模型组和假埋线组减小(P<0.05)。5.透射电镜下上皮细胞内质网形态:模型组和假埋线组内质网肿胀扩张、甚至出现大量空泡状,核糖体脱落明显,穴位埋线组与丙酸氟替卡松组上皮细胞内质网病理情况好转。6.WB结果显示:在各组Claudin-1和Occludin测定结果的比较中,假埋线组、模型组表达明显下降,组间无明显统计学差异(P>0.05)。穴位埋线组和丙酸氟替卡松组均能促进Claudin-1和Occludin蛋白表达,且组间显示无明显统计学差异(P>0.05)。结论:1.紧密连接蛋白Claudin-1和Occludin的表达下降,紧密连接遭到破坏,鼻黏膜上皮屏障功能减弱,利于变应原的跨上皮传递而引发变态反应,或许是AR发病的关键机制。2.穴位埋线能使AR大鼠血清s Ig E下降,缓解鼻黏膜的炎性反应,明显地减轻AR相关症状,且和丙酸氟替卡松治疗相比无明显统计学差异(P>0.05)。3.穴位埋线能提高紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin的水平,改善鼻黏膜上皮细胞紧密连接,加强鼻黏膜屏障功能,从而减少变应原的入侵,缓解AR相关症状,对AR的治疗产生积极作用。