研究背景近年来,“代谢程序化”理论的提出将成人时期多种疾病的根源追溯到了胎儿期。该理论认为,早期宫内环境的应激状态可导致胎儿为了生存而发生一系列代谢和内分泌改变,为成年时期多种疾病的发生发展埋下伏笔。因此了解参与调控胎儿宫内生长发育及各系统功能的因素及其效应,不仅对获得良好的妊娠结局具有重要意义,还可为从源头上预防成人代谢性疾病奠定基础。孕期营养状况一直以来被认为在胎儿的生长发育中起到至关重要的作用,其中长链多不饱和脂肪酸(Long chain polyunsaturated fatty acid, LC-PUFAs)在胎儿生长发育及其免疫功能方面的作用是近年来关注的热点。LC-PUFAs是指链长在18个碳原子以上并含有多个顺式不饱和键的脂肪酸,主要包括花生四烯酸(AA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)。研究发现,大量的LC-PUFAs,尤其是AA和DHA,在胎盘组织蓄积,提示LC-PUFAs可能在胎儿的生长发育及其各系统功能的发生发展中起到重要作用。目前有关孕妇LC-PUFAs与胎儿生长发育及其免疫功能关系的研究结果仍不尽一致。LC-PUFAs与胎儿生长发育方面,有的研究发现,孕期较高的LC-PUFAs摄入可起到促进胎儿生长发育的作用,但另外一些研究显示孕期LC-PUFAs摄入量与胎儿生长发育状况无关；甚至有研究观察到孕期较高的鱼类及n-3PUFA摄入使胎儿生长发育迟缓的发生率增加。LC-PUFAs与胎儿免疫功能方面,目前的研究多针对成人且多集中在n-3PUFA对免疫力低下的病人的免疫调节及抗炎作用,有关LC-PUFAs对正常人群尤其是对胎儿、新生儿免疫功能影响的研究很少。值得注意的是,由于n-3PUFA与n-6PUFA在免疫和炎症反应等方面具有不同的作用,因此保持机体n-6与n-3PUFA的平衡具有重要意义。由此可见,分析LC-PUFAs与胎儿生长发育及其免疫功能关系是很有价值的,相关研究目前国内外鲜有报道。为此,本项目在广州市越秀区和白云区选取身体健康的妊娠期妇女作为调查对象,通过问卷调查、体格测量和实验室检测相结合的方法系统地调查妇女孕期营养状况、胎儿生长发育状况、孕妇和胎儿血清中的LC-PUFAs (AA、DHA、EPA等)水平以及反映胎儿免疫功能的指标包括血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和部分炎性因子(IFN-γ、IL-6)水平,分析孕妇膳食LC-PUFAs摄入量、孕妇血清及胎儿血清LC-PUFAs水平之间的关系,并在校正可能的混杂因素后系统地分析孕妇和胎儿血清LC-PUFAs水平与胎儿的生长发育状况的关系以及胎儿血清LC-PUFAs水平和不同的n-6/n-3PUFA比例与胎儿免疫功能的关系,其结果有助于阐明LC-PUFAs在胎儿生长发育及其免疫功能调节中的作用,为通过调整孕期膳食从而调节孕妇及胎儿LC-PUFAs水平以获得良好的妊娠结局提供新的科学依据。研究目的分析孕妇膳食LC-PUFAs摄入量、孕妇血清及胎儿血清LC-PUFAs水平之间的关系；孕妇血清及胎儿血清LC-PUFAs水平与胎儿生长发育的关系,以及胎儿血清LC-PUFAs水平和不同的n-6/n-3PUFA比例与胎儿免疫功能的关系,探讨LC-PUFAs在胎儿生长发育及其免疫功能方面的作用,为采取有针对性的营养干预措施,进而获得良好的妊娠结局提供科学依据。研究方法以广州市越秀区妇幼保健院和白云区妇幼保健院所辖的五所郊区医院作为调查点,选取到调查点进行产前检查并建档,拟在上述妇幼保健院或医院分娩的身体健康的533名孕晚期妇女作为研究对象,共获得有效问卷459份,问卷内容包括孕妇基本情况、膳食状况、分娩情况等；共获得未溶血孕妇血清378份,胎儿脐血320份。血清检测的指标包括长链多不饱和脂肪酸、IgG、IgA、IgM、 IFN-γ、IL-6。问卷调查及实验室检测所得到的数据资料采用EpiData3.1建立数据库,用专业的膳食软件进行膳食数据的录入和评价,用SPSS13.0统计软件进行数据分析。所使用的统计方法主要包括描述性统计、配对非参数检验、Spearman相关分析、多元线性回归分析方法。研究结果1孕妇膳食营养及脂肪酸摄入状况本次调查中妇女孕晚期每日谷类、畜肉类、禽类、水产类的平均摄入量达到膳食宝塔的推荐摄入量,蔬菜、水果、蛋类的平均摄入量与膳食宝塔推荐量比较稍有不足,大豆类、奶类及其制品的平均摄入量远低于膳食宝塔的推荐量。孕妇孕晚期平均每日能量、蛋白质、脂肪、碳水化合物、锌、维生素A、维生素E、维生素B1、烟酸和维生素C的摄入量基本达到RNI/AI的要求,其中脂肪供能比为24.40%。钙、铁、维生素B2的摄入量较低,均未达到80%RNI/AI值。本次调查对象膳食总脂肪酸、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUPA)及多不饱和脂肪酸(PUFA)平均每日摄入量的中位数分别为51.89g、13.63g、23.01g、13.14g。膳食SFA/MUPA/PUFA比值为1：1.7：1.1,n-6/n-3PUFA比值为9.53：1。2孕妇膳食多不饱和脂肪酸摄入量与血清多不饱和脂肪酸水平的关系Spearman相关分析结果显示,孕妇孕晚期膳食EPA、DHA摄入量与孕妇血清EPA、DHA水平呈正相关(P<0.01)；孕妇孕晚期膳食EPA摄入量与胎儿血清EPA水平呈正相关(P<0.01)。3孕妇血清与胎儿血清多不饱和脂肪酸水平的关系配对非参数检验分析结果显示,胎儿血清LA、ALA、总n-6PUFA水平以及n-6/n-3PUFA比值显著低于孕妇血清(P<0.01),而胎儿血清AA、EPA、DHA、总n-3PUFA水平显著高于孕妇血清(除EPA的P<0.05外,其余P<0.01)。Spearman相关分析结果显示,孕妇血清与胎儿血清的LA、AA、EPA、DHA、总n-3PUFA水平以及n-6/n-3PUFA比值均呈正相关(P<0.01)。4孕妇血清和胎儿血清多不饱和脂肪酸水平与胎儿生长发育的关系Spearman相关分析结果显示,孕妇血清EPA、DHA、总n-3PUFA水平与新生儿出生胎龄均呈负相关(除EPA的P<0.01外,其余P<0.05)。在校正了可能的混杂因素后,发现孕妇血清EPA水平对新生儿出生胎龄的显著负向调节作用依然存在(β=-0.112,P=0.039)。Spearman相关分析结果显示,胎儿血清DHA、总n-3PUFA水平与新生儿出生胎龄呈正相关(P<0.01)；胎儿血清LA水平与新生儿出生身长均呈负相关(P<0.05)。校正了可能的混杂因素后,发现胎儿血清DHA、总n-3PUFA水平对新生儿出生胎龄的显著正向调节作用依然存在(依次为：β=0.248,P=0.000；β=0.234,P=0.000),还发现胎儿血清总n-6PUFA对新生儿出生胎龄有显著的正向调节作用(β=0.118,P=0.046)。未见孕妇血清和胎儿血清各种LC-PUFAs、总n-6PUFA、总n-3PUFA对新生儿出生体重和出生身长的调节作用。5胎儿血清多不饱和脂肪酸水平与胎儿免疫功能的关系胎儿血清IgG、IgA、IgM水平分别为10.98±2.44g/L、0.07±0.01g/L、0.86±0.14g/L。Spearman相关分析结果显示,胎儿血清LA、DHA、总n-3PUFA水平均与胎儿血清IgG水平呈正相关(P<0.01), ALA水平与IgA、IgM水平均呈正相关(P<0.01), EPA水平则与IgA、IgM水平均呈负相关(分别P<0.05和P<0.01)。校正可能的混杂因素后,发现胎儿血清DHA水平对胎儿血清IgG水平依然有显著的正向调节作用(β=0.125, P=0.046), ALA水平对IgA、IgM水平均仍有显著的正向调节作用(依次为:β=0.215, P=0.001;β=0.190, P=0.003),EPA水平对IgA、IgM水平的显著负向调节作用也依然存在(依次为：β=0.156,P=0.016;β-0.137,P=0.033)。胎儿血清IFN-γ、IL-6水平分别为54.79±44.1pg/ml19.47±94.22pg/ml,经自然对数转换后的脐血IL-6水平为1.47±1.10pg/ml。Spearman相关分析结果显示,胎儿血清DHA、总n-3PUFA水平与胎儿血清IFN-γ水平呈正相关(P<0.05)。在校正了可能的混杂因素后,发现胎儿血清DHA、总n-3PUFA水平对IFN-γ水平的显著正向调节作用仍存在(依次为：β=0.133, P=0.030; β=0.131, P=0.033),还发现胎儿血清EPA水平对IL-6水平有显著的正向调节作用(β=0.143,P=0.023)。6胎儿血清n-6/n-3PUFA与胎儿免疫功能的关系Spearman相关分析结果显示,胎儿血清n-6/n-3PUFA比值与胎儿血清IgG水平呈负相关(P<0.05),进一步校正可能的混杂因素后,未见胎儿血清n-6/n-3PUFA比值对胎儿血清IgG、IgA、IgM的显著调节作用。Spearman相关分析结果显示,胎儿血清n-6/n-3PUFA比值与胎儿血清IFN-γ水平呈显著负相关(P<0.05),在校正了可能的混杂因素后,发现胎儿血清n-6/n-3PUFA比值对胎儿血清IFN-γ水平产生的显著负向影响依然存在(β=-0.140,P=0.023)。未见胎儿血清n-6/n-3PUFA比值对胎儿血清IL-6的显著调节作用。结论1孕妇孕晚期膳食EPA、DHA摄入量与其血清EPA、DHA水平及胎儿血清EPA水平呈显著正相关；胎儿血清LA、ALA水平低于孕妇血清,AA、DHA水平则高于孕妇血清,提示AA、DHA在胎盘的运输可能为逆浓度梯度的主动转运；2孕妇血清EPA水平对新生儿出生胎龄具有负向调节作用；胎儿血清DHA、总n-3PUFA、总n-6PUFA水平对新生儿出生胎龄具有正向调节作用；但未发现孕妇和胎儿血清各种LC-PUFAs水平与新生儿出生体重和出生身长的关系；3胎儿血清DHA水平对胎儿血清IgG水平具有正向调节作用,ALA水平对IgA、IgM水平均具有正向调节作用,EPA水平则对IgA、IgM水平均具有负向调节作用；胎儿血清DHA水平对Thl型细胞因子IFN-γ水平具有正向调节作用,EPA水平对Th2型细胞因子IL-6水平具有正向调节作用；胎儿血清中n.6/n-3PUFA比值越大,IFN-γ水平则越低,但未见胎儿血清n-6/n-3PUFA比值与IgG、IgA、IgM、IL-6的关系。