【摘 要】
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目的:研究分离纯化的人参皂苷Rb2对牛主动脉内皮细胞(BAEC)纤维蛋白溶酶活性的作用。方法:使用底物发光试剂S-2403测定细胞内PA的溶解产物。血管内皮细胞表面纤溶酶活性的测定
【机 构】
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华东理工大学生物化学研究所生物反应器国家重点实验室;华东理工大学生物化学研究所生物反应器国家重点实验室上海200237中国;上海200237中国;
【出 处】
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Acta Pharmacologica Sinica
【基金项目】
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Shanghai Key Discipline
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目的:研究分离纯化的人参皂苷Rb2对牛主动脉内皮细胞(BAEC)纤维蛋白溶酶活性的作用。方法:使用底物发光试剂S-2403测定细胞内PA的溶解产物。血管内皮细胞表面纤溶酶活性的测定采用BAEC纤维蛋白的载体技术。用酶谱分析和还原酶谱分析法通过培养液来分析细胞产生的纤溶酶原激活物(PA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)。用Northernblot分析uPA,uPA receptor和PAI-1的mRNA表达。结果:Rb2对于血管内皮细胞产生的PA活性的促进作用表现出剂量、时间依赖性。Rb2 10mg/L对内皮细胞处理9小时后,血管内皮细胞的PA活性提高了2.5倍。培养液中LDH检测表明Rb2未表现出明显细胞毒性。纤维蛋白测定表明,PA水平的增加进而提高了纤维蛋白溶酶的水平。Rb2能够显著增加培养液中尿激酶型PA(uPA)和其拮抗物(PAI-1)的水平,但Rb2对于uPA,其表面受体(uPAR)和PAI-1的mRNA水平无影响,同时添加Rb2 1mg/L能够显著增强维甲酸(RA 0.001-1μmol/L)对PA合成的刺激作用。结论:Rb2能增加血管内皮细胞表面纤溶酶的活性,是通过促进血管内皮细胞纤溶活性因子的分泌而不是通过增强其基因表达起作用的。
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