【摘 要】
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目的 研究促红细胞生成素(EPO)是否可以保护神经元免受氯胺酮所致损伤.方法 原代培养神经元,分别加入不同浓度的氯胺酮、EPO后培养24 h.噻唑蓝(MTT)法检测神经元存活率,TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测凋亡神经元,荧光法测定半胱氨酸蛋白水解酶(caspase)-3活性,蛋白质印迹法检测磷酸化蛋白激酶B(pAkt)的表达.结果 1、10、30 μmol/L氯胺酮处理组神
【机 构】
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430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科,430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科,430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科
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目的 研究促红细胞生成素(EPO)是否可以保护神经元免受氯胺酮所致损伤.方法 原代培养神经元,分别加入不同浓度的氯胺酮、EPO后培养24 h.噻唑蓝(MTT)法检测神经元存活率,TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测凋亡神经元,荧光法测定半胱氨酸蛋白水解酶(caspase)-3活性,蛋白质印迹法检测磷酸化蛋白激酶B(pAkt)的表达.结果 1、10、30 μmol/L氯胺酮处理组神经元的存活率分别为(91±5)%、(42±6)%和(23±7)%,明显低于对照组(P＜0.05或0.01);10 μmol/L氯胺酮分别加0.3、1、3、10 U/mlEPO处理组神经元存活率分别为(73±6)%、(86±9)%、(78±8)%和(71±10)%,明显高于10 μmol/L氯胺酮组(P＜0.05或0.01).10 μmol/L氯胺酮组神经元凋亡增加,caspase-3相对活性为(280±60)%,明显高于对照组[(97±15)%,P＜0.01],而pAkt的表达减少.10 μmol/L氯胺酮+1 U/mlEPO组caspase-3相对活性为(130±30)%,明显低于10 μmol/L氯胺酮组,而pAkt表达增加.磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002拮抗了EPO的作用.结论 EPO可以保护神经元免受氯胺酮导致的损伤,其保护作用是通过促进pAkt表达实现的。
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