建立了液相色谱-稳定同位素质谱联用（LC-IRMS）检测咖啡因的δ13C分析方法,用于鉴定咖啡饮料中咖啡因天然来源的真实性。样品中咖啡因经液相色谱分离纯化,色谱条件为:XBridge Shild RP C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,3.5μm）,柱温50℃,流动相为超纯水,流速400μL/min;再通过LC-IsoLink实现目标物全部氧化为CO₂气体,最终以气态形式进入稳定同位素质谱仪,直接检测样品中咖啡因的δ¹³C。检测44个不同产地来源的咖啡豆样品中咖啡因的δ¹³C,其范围是-25.3‰～-30.9‰,δ¹³C平均值δaverage=-27.9‰,标准偏差s=1.3‰,以3倍δ¹³C标准偏差s为判断依据,检测16个咖啡饮料样品的咖啡因δ13C,结果表明,1个咖啡饮料样品中咖啡因δ¹³C在3倍标准差线附近（δaverage-3s,-31. 7‰）,判别其咖啡因为非咖啡豆来源。LC-IRMS同位素质谱测定咖啡因δ¹³C的分析方法,可用于鉴别咖啡饮料天然来源的真实性。