【摘 要】
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采用RT-PCR技术从小反刍兽疫病毒(PPRV)中扩增出C基因。将C基因亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建出重组表达质粒pGEX-6P-卜PPRV-C。将重组质粒转化Rosetta感受态细胞后,经IP
【机 构】
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安徽农业大学动物科技学院,宁波市疾病预防控制中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31602063),国家级大学生创新训练计划项目(201610364022),安徽省自然科学基金资助项目(1508085QC60),安徽农业大学稳定和引进人才科研项目(YJ2015-16)
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采用RT-PCR技术从小反刍兽疫病毒(PPRV)中扩增出C基因。将C基因亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建出重组表达质粒pGEX-6P-卜PPRV-C。将重组质粒转化Rosetta感受态细胞后,经IPTG诱导表达目的蛋白。表达出的重组蛋白经SDS-PAGE和Western-blot鉴定正确后,免疫6周龄BALB/c雌鼠,制备多克隆抗体血清。结果表明:C蛋白在大肠埃希菌中主要以包涵体的形式表达,分子量大小约为42 ku;Western-blot结果表明重组C蛋白具有良好的反应原性;琼脂扩散试验结
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