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目的
从耐亚胺培南革兰阴性杆菌中筛查金属β内酰胺酶（MBL）及1型新德里金属蛋白酶（NDM）-1，为NDM-1携带菌感染的治疗及防控提供试验依据。
方法回顾性对广州市妇女儿童医疗中心2010年从7例患者分离的7株耐亚胺培南革兰阴性杆菌进行NDM-1基因筛查，使用亚胺培南-EDTA双协同试验筛查MBL阳性菌株，设计特异性引物PCR扩增NDM-1基因，并将其克隆入pMD-T载体，转化Dh5a，提取重组质粒进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定，并将重组质粒菌进行测序验证。
结果从7株亚胺培南耐药革兰阴性杆菌中筛出2株MBL阳性株，分别为1株鲍曼不动杆菌和1株琼氏不动杆菌，其中MBL阳性琼氏不动杆菌PCR扩增出NDM-1目的产物，将NDM-1成功克隆入pMD-T，双酶切鉴定见目的条带，重组质粒测序验证了其为NDM-1基因，序列同源性分析显示其与已知NDM-1基因序列高度一致（99.9%），813碱基中仅第468核苷酸G-A突变，其演绎的氨基酸序列与已知NDM-1完全一致，其序列已登录GenBank，登录号为HQ603057。药敏试验显示此琼氏不动杆菌对除氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦外的其他所测试的β内酰胺类抗生素均耐药，但对替加环素、氟喹诺酮、氨基糖苷类敏感。
结论在住院儿童血液中筛查出携带NDM-1琼氏不动杆菌，提示临床试验室应加强亚胺培南耐药革兰阴性杆菌NDM-1基因的筛查，为NDM-1携带菌感染的治疗及防控提供试验依据。（中华检验医学杂志,2013,36:916-919）