目的在蛋白表达水平上探讨华蟾素注射液对抗人肝癌多药耐药的机制。方法体外培养人肝癌耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-7402/FU,MTT法测定华蟾素注射液细胞毒性及耐药逆转作用。双向凝胶电泳与质谱技术检测0.26 mg/L华蟾素注射液作用于耐药细胞株前后的差异表达蛋白,Western blot验证质谱鉴定的蛋白FAK、CRT和TMOD3表达情况。结果华蟾素注射液对细胞Bel-FU的IC50为0.66 mg/L,浓度为0.08、0.16及0.32 mg/L华蟾素注射液的耐药逆转倍数分别为1.56、2.18及2.99倍;0.26 mg/L华蟾素注射液作用后,耐药细胞中13个蛋白点表达下调,另有1个蛋白点表达上调。华蟾素注射液下调耐药细胞中FAK、CRT和TMOD3表达与双向凝胶电泳及质谱技术检测的差异表达蛋白变化一致。结论华蟾素注射液可引起耐药相关蛋白表达变化而逆转多药耐药。