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在ＢＨＫ２１细胞中增殖伪狂犬病病毒（ＰＲＶ），提纯ＰＲＶＤＮＡ，选编码特异性糖蛋白ｇｐ５０中的２６２ｂｐ片段进行ＰＣＲ扩增。扩增产物经Ｋｐｎ１和ＳａｌＩ双酶切后，将２２２ｂｐ片与持闰ＰＵＣ１９连接构成重组子ＰＵＰ。通过转化大肠杆菌ＪＭ８３，、Ａｍｐ和α互补效应筛选后，扩增、提纯重组子ＰＵＰ，用ＫｐｎＩ和ＳａｌＩ酶切，电泳回收克隆的２２２ｂｐ片段，用光敏生物素标记２２２ｂｐ和重组子ＰＵＰ制备的探针，