【摘 要】
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目的原核表达细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-Transferase,GST)蛋白,分析其结构与功能特点。方法将EgGST基因亚克隆于PET-28b表达
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81871670);江苏省“青蓝工程”资助项目(53041611);徐州医学院优秀人才科研启动基金资助项目(D2015004)
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目的原核表达细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-Transferase,GST)蛋白,分析其结构与功能特点。方法将EgGST基因亚克隆于PET-28b表达载体,转化至大肠埃希菌BL21中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导蛋白表达;蛋白经Ni柱纯化后,用SDS-PAGE及Western-blot进行鉴定;并运用DNAstar软件及在线软件预测分析其结构与功能特点。结果重组EgGST蛋白以可溶性形式在大肠埃希菌中高效表达,其相对分子质量为45 000;该蛋白潜在B细胞表位区域为aa 26～33,89～97,116～124,147～158,201～215;潜在T细胞表位区域为aa 12～20,122～120,79～87,61～69,29～37,62～70。结论成功获得可溶性重组EgGST蛋白,该蛋白具有一定的免疫原性,具有成为细粒棘球蚴病疫苗分子潜力。
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