白细胞蛋白酶抑制因子促进真皮间充质干细胞增殖的机制

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目的 研究白细胞蛋白酶抑制因子(secretory leukocyte protease inhibitor, SLPI)对真皮间充质干细胞(dermal mesenchymal stem cells, dMSCs)的增殖作用及其机制.方法 利用贴壁生长的特性分离dMSCs,细胞在无血清IMDM培养液中培养48h后,加入不同浓度的SLPI,24h后加入[H3]Thymidine,通过液闪计数器计数.提取对照组和SLPI作用后细胞的总RNA和蛋白,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SLPI因子作用前后cyclin A、CDK2、CDK4的变化,Western blot检测SLPI因子作用前后cyclin D1、cyclin E的表达变化.结果 分离的大鼠dMSCs呈梭形,在体外显示多向分化潜能.加入SLPI因子后,[H3]Thymidine 掺入活性增强.RT-PCR提示在SLPI诱导下,CDK2表达增强,而cyclin A和CDK4表达没有明显变化,Western blot提示SLPI因子作用后cyclin D1、cyclin E表达均明显增强.结论 SLPI能够促进dMSCs的增殖,其机制可能是通过调节cyclin D1、cyclin E、CDK2等细胞周期素的表达。

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