论文部分内容阅读
目的
利用多重聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）方法，扩增鼠疫耶尔森菌（简称鼠疫菌）DNA中的差异区段（different region，DFR ），探讨建立鼠疫菌多重DFR分型技术的可行性。
方法根据鼠疫菌23个DFR及pMT质粒的靶标产物长度，将24对引物进行优化组合，通过不同的组合在一个PCR反应体系中加入多对引物，针对已知阳性DNA模板扩增出多个目的片段。并将200株野生鼠疫菌DNA经多重PCR和普通PCR扩增，验证这两种方法的符合率。
结果用已知阳性DNA模板扩增出24个目的片段。通过不同的排列组合，将24对引物优化组合出9个组。通过200株野生鼠疫菌DNA验证多重PCR和普通PCR的符合率为100%。
结论利用多重PCR方法对鼠疫菌DNA中的DFR进行分型是可行的，应用该方法能为大批量鼠疫菌DFR分型鉴定提供高效、经济且准确率高的实验手段。