不相容双质粒共表达大肠杆菌肉碱脱水酶基因caiB及其辅因子合成酶基因caiE

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【摘要】

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基因caiB和基因caiE分别编码肉碱脱水酶及其辅因子合成酶,携带这两个基因的重组菌可以共表达两个外源蛋白,得到高活性肉碱脱水酶.分别构建这两个基因的表达质粒pET28caiB和pE

【作者】

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范立强袁勤生吴祥甫

【机构】

：

华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,中国科学院上海细胞与生物化学研究所

【出处】

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中国医药工业杂志

【发表日期】

：

2002年3期

【关键词】

：

肉碱巴豆甜菜碱脱水酶不相容质粒共表达大肠杆菌 carnitine crotonobetaine dehydratase incompatible

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基因caiB和基因caiE分别编码肉碱脱水酶及其辅因子合成酶,携带这两个基因的重组菌可以共表达两个外源蛋白,得到高活性肉碱脱水酶.分别构建这两个基因的表达质粒pET28caiB和pET22caiE,利用双抗生素筛选法,获得能稳定遗传的双质粒转化子.经IPTG诱导,两个基因共表达,表达量分别占菌体总蛋白的39%和20%,共转化菌的酶活力比pET28caiB单转化菌提高了2.3倍,并由此建立了不相容双质粒共表达外源基因的新方法.

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