【摘 要】
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根据文献报道的脊椎动物催乳素基因cDNA序列的保守区,设计1对引物.提取绦虫总RNA,采用RT-PCR扩增绦虫催乳素基因,琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物,将回收产物连接到pMD-18T克隆载
【机 构】
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解放军军需大学动物科技系,吉林,长春,130062
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根据文献报道的脊椎动物催乳素基因cDNA序列的保守区,设计1对引物.提取绦虫总RNA,采用RT-PCR扩增绦虫催乳素基因,琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物,将回收产物连接到pMD-18T克隆载体,对待选克隆进行PCR和酶切鉴定.阳性克隆进行序列测定,获得全长893 bp的cDNA序列,共编码222个氨基酸,其中前22个氨基酸为信号肽,成熟蛋白共编码200个氨基酸.将测序结果与GenBank中已知序列比较,推导氨基酸序列并进行活性位点分析,所得序列与脊椎动物催乳素同源性最高,含有催乳素的2个活性区域,证明所得到的序列就是催乳素序列.
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