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目的探讨内源性硫化氢(H2S)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗中的作用。方法 3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成熟后,分别加入0、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml TNF-α培养24 h,干预组在加入50 ng/ml TNF-α前30 min分别加入胱硫醚γ-裂解酶(CSE)抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG,10 mmol/L)和二辛可宁酸(BCA,2 mmol/L)。上述处理后各组细胞用胰岛素刺激。另设无TNF-α和胰岛素作用的对照组。用葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖消耗,2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖摄入法检测葡萄糖摄取,亚甲基蓝法测定检测细胞H2S含量。结果与对照组比较,3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖消耗[(32.43±2.60)%vs(5.31±1.87)%,P<0.01]和摄取[(7.91±0.31)cpm vs(1.38±0.13)cpm,P<0.01]明显增加,10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml TNF-α作用后脂肪细胞葡萄糖消耗[(23.27±1.41)%、(14.73±3.76)%、(7.81±1.56)%vs(32.43±2.60)%,P<0.01)和摄取[(5.86±0.95)cpm、(2.60±0.35)cpm、(1.87±0.17)cpm vs(7.91±0.31)cpm,P<0.01)呈剂量依赖性减少;而H2S生成量呈浓度依赖性增加[(0.06±0.002)mmol/(g·protein)、(0.11±0.003)mmol/(g·protein)、(0.14±0.005)mmol/(g·protein)vs(0.17±0.001)mmol/(g·protein),P<0.01)]。PPG和BCA预处理分别使脂肪细胞对胰岛素刺激的葡萄糖消耗[(24.52±2.63)%、(27.84±1.82)%vs(14.73±3.76)%,P<0.01]和葡萄糖摄取[(7.22±0.27)cpm、(7.96±0.19)cpm vs(2.60±0.35)cpm,P<0.01]显著增加。结论内源性H2S在TNF-α诱导的脂肪细胞胰岛抵抗中发挥介导作用,抑制内源性CSE/H2S体系可能是治疗胰岛素抵抗的新靶点。