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目的 建立出生5 d大鼠海马神经元原代培养方法,并研究该神经元的缺氧耐受性.方法 改进出生5d大鼠海马神经元原代培养方法,分离海马时分为充氧组与对照组,培养过程中倒置显微镜和细胞核因子(NF)免疫组织化学法观察细胞生长和形态.原代培养7 d后,分别对出生5 d大鼠海马神经元和出生1 d大鼠海马神经元进行12h、24h的缺氧处理(0%O2、5%CO2、95%N2),MTT法检测细胞存活情况.结果 (1)充氧组中培养的出生5 d大鼠海马神经元生长状态要优于对照组中培养的神经元.(2)缺氧12 h出生1 d以及5 d大鼠海马神经元存活率分别为(81.5±2.3)%和(89.4±2.2)%(P<0.01);缺氧24h二者存活率分别为(75.0±2.8)%和(85.0±2.2)%(P<0.01).5 d海马神经元缺氧耐受能力优于1 d大鼠海马神经元.结论 海马神经元分离培养过程中充氧有利于神经元的原代培养,出生5 d大鼠海马神经元缺氧耐受力强于出生1 d大鼠海马神经元。