【摘 要】
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在家蚕耐氟近等基因系SSH文库中发现一条差异表达的EST序列.以家蚕耐氟近等基因系群体的幼虫中肠cDNA为模板,利用RACE技术克隆了该基因的全长cDNA序列,将该基因命名为Asp(Gen
【机 构】
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江苏科技大学,江苏镇江,212003;中国农业科学院蚕业研究所,江苏镇江,212018
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在家蚕耐氟近等基因系SSH文库中发现一条差异表达的EST序列.以家蚕耐氟近等基因系群体的幼虫中肠cDNA为模板,利用RACE技术克隆了该基因的全长cDNA序列,将该基因命名为Asp(GenBank登录号:JX312360).该基因cDNA全长868 bp,包括20 bp的5′-UTR和77 bp的3′-UTR,ORF为771 bp,编码256个氨基酸.该基因由4个外显子和3个内含子组成,编码蛋白质为亲水性蛋白,属于丝氨酸蛋白酶家族,在第17 ～18氨基酸残基处存在信号肽切割位点.荧光定量PCR检测该基因在家蚕耐氟近等基因系群体幼虫的中肠、脂肪体及马氏管中都有表达,以中肠的表达量最高,表达量因个体的耐氟性而存在差异:中肠中,敏感个体的表达量是耐氟个体的2.49倍；脂肪体中,敏感个体与耐氟个体之间的表达量差异不显著；马氏管中,敏感个体的表达量是耐氟个体的8.16倍.该基因在不同耐氟性家蚕品种5龄幼虫中肠的表达量存在极显著差异,在耐氟性品种的表达量是氟敏感品种的50倍.研究结果提示,该碱性丝氨酸蛋白酶基因可能与家蚕的耐氟性有一定的关联.
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