【摘 要】
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目的研究爪蟾胞内精子注射法(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)转基因技术的可行性.方法取成熟雄蛙的睾丸分离纯化精子,用毛地黄皂甙(digitonin)崩解精细胞膜并制备精
【机 构】
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第一军医大学肿瘤研究所,中南大学湘雅医学院肿瘤研究所
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目的研究爪蟾胞内精子注射法(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)转基因技术的可行性.方法取成熟雄蛙的睾丸分离纯化精子,用毛地黄皂甙(digitonin)崩解精细胞膜并制备精子浓缩液,然后与线性化报告基因载体pCMV-EGFP-N1共处理,最后将处理后的精子注射入从雌性爪蟾体内取出的未受精卵中,培养并观察.结果制备的精子质量较高,稀释的精子注射人未受精卵后,卵的受精率为10%,受精卵活过神经胚的比率为20%,但都略微有点畸形.其中,绿色荧光报告基因EGFP的整合率为8
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