【摘 要】
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目的 利用建立的西尼罗假病毒报告系统,体外筛选获得抗西尼罗病毒抗体.方法 首先,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测由噬菌体展示技术筛选获得的13株抗西尼罗病毒候选抗体与靶
【机 构】
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100850 北京军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所;010058 呼和浩特,内蒙古医科大学内蒙古自治区分子生物学重点实验室
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目的 利用建立的西尼罗假病毒报告系统,体外筛选获得抗西尼罗病毒抗体.方法 首先,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测由噬菌体展示技术筛选获得的13株抗西尼罗病毒候选抗体与靶蛋白-西尼罗病毒E蛋白结构域Ⅲ(DⅢ)的结合;其次,将收集的含有西尼罗假病毒的细胞培养上清稀释102倍,分别与相应浓度的候选抗体室温孵育1 h后,将假病毒上清+抗体混合液感染BHK21或者K562细胞,48 h后,裂解细胞测荧光素酶活性(RLU).结果 13株候选抗体均能识别并结合西尼罗病毒E蛋白DⅢ;其中2株抗体(抗体5和7)具有较好的中和活性,低浓度下(5 mg/L)即能有效阻断病毒入侵靶细胞;而2株抗体(抗体3和8)具有抗体增强效应(ADE),表现为靶细胞病毒感染增强.结论 利用建立的西尼罗假病毒报告系统,体外筛选获得2株具有中和活性的抗西尼罗病毒抗体.
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