【摘 要】
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探寻一种准确测定牛初乳中IgG含量的前处理方法及液相色谱分离条件,选用超声波、生理盐水、盐酸和乳酸作为去除乳脂和酪蛋白沉淀的前处理条件;选用反相键合色谱柱ZORBAX 300S
【机 构】
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内蒙古农业大学动物科学与医学学院,山东理工大学生命科学学院,山东理工大学分析测试中心
【基金项目】
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山东省自然科学基金(奶牛热应激的补偿生长机制研究,2004ZX27)
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探寻一种准确测定牛初乳中IgG含量的前处理方法及液相色谱分离条件,选用超声波、生理盐水、盐酸和乳酸作为去除乳脂和酪蛋白沉淀的前处理条件;选用反相键合色谱柱ZORBAX 300SB-C18和ZORBAX Poroshell 300SB-C18,流动相为0.02mol/L PBS与乙腈作为色谱分离条件对初乳清进行分离;并测定其精密度和回收率。试验结果表明:选用超声波40kHZ、45min时,牛初乳中IgG含量达到最高,比没有经过超声处理的IgG含量提高近两倍;选用乳清与生理盐水的稀释比例为1:7时,牛初乳中IgG含量达到最高;选用乳酸调pH值至4.6时,可以更好的去除酪蛋白沉淀;选用反相键合色谱柱ZORBAX 300SB-C18,流动相0.02mol/L PBS(pH6.8)与乙腈的比例为95:5、流速为0.2mL/min时,初乳各蛋白组分分离效果达到最佳。所测定的精密度和回收率分别为0.11%和99.96%。
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